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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 分子生物 » 綜合其他 » QPCR
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shiliyusly新蟲 (小有名氣)
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[求助]
QPCR
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 想請教下高手，進行熒光定量PCR進行測定基因表達豐度的相對值的一般步驟是什么呢？我之前用QPCR的基因先用普通PCR摸索最佳退火溫度，然后再進行SYBR 染料QPCR，這兩種PCR的酶是不同的。 通過看溶解曲線發(fā)現(xiàn)普通PCR摸索的退火溫度用于QPCR并不是最佳的，所以還得用QPCR重新摸索，實在麻煩，還有些會有弱弱的小峰（下面兩個溶解曲線可用嗎），那就要做濃度梯度做擴增效率了嗎？覺得實在是麻煩啊，有點想偷懶了。。。麻煩高手指點下，非常感謝�。。。。。。。。。。。。。�！ ACT比較.jpg |
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