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summer2771木蟲 (正式寫手)
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[交流]
WB的蛋白總量,變還是不變? 已有4人參與
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請教大家的意見,經(jīng)?梢钥吹秸撐闹校ò▽W(xué)位論文),只做某些蛋白的磷酸化表達(dá),而不做蛋白總量表達(dá)。是否可以理解為,某蛋白的總量跟內(nèi)參一樣,是相對恒定不變的,即便是有波動,但也并無顯著性差異。由此則只要計(jì)算出磷酸化表達(dá)的相對量即可說明磷酸化率究竟是上升還是下調(diào),從而表明該蛋白的變化。 我的實(shí)驗(yàn)中出現(xiàn)了有好多例都是各個(gè)組的蛋白總量也是有顯著不同的,磷酸化表達(dá)也是不同的,我用磷酸化表達(dá)/總量表達(dá)的Ratio來說明問題,出現(xiàn)的趨勢卻可能是跟磷酸化、總量本身的變化趨勢相反,即磷酸化、總量均上升,但是Ratio卻可能是下調(diào)的。 看國外國內(nèi)很多的論文,從條帶上來看,基本上總量似乎是沒有差異的。 我就有點(diǎn)納悶了,難道我的實(shí)驗(yàn)出現(xiàn)了問題? |
Biological |
木蟲 (正式寫手)
鐵桿木蟲 (職業(yè)作家)
金蟲 (小有名氣)

木蟲 (正式寫手)
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謝謝各位戰(zhàn)友的熱心回復(fù)! 我是同時(shí)做了磷酸化與蛋白總量的,但是發(fā)現(xiàn)有個(gè)問題,就是我的蛋白總量也是變化的,而且具有顯著性的差異,磷酸化也是有變化的,比如:某一個(gè)蛋白的蛋白總量,實(shí)驗(yàn)組與對照組相比,是升高的;磷酸化表達(dá)的相對倍數(shù)也是升高的;但是用磷酸化表達(dá)/蛋白總量后,比值卻是下降的.... 有朋友告訴我說,一般總量是不變,即變化比較小,沒有顯著性差異,倍數(shù)來看,可能是1.0幾或者是0.9幾倍,統(tǒng)計(jì)出來的結(jié)果是p大于0.05的。我看過的論文中,做了磷酸化與總量的,從條帶來看,都是比較齊的,看不出會有顯著性的差異。這是我比較納悶的地方。畢竟磷酸化表達(dá)只是蛋白表達(dá)中很小的一部分,所以即便是磷酸化表達(dá)有變化,總量應(yīng)該是相對較為恒定,沒有顯著性升高或降低的。 |
木蟲 (正式寫手)
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