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machao8405木蟲 (正式寫手)
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[求助]
熒光定量如何安排樣品
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| 小弟最近在做熒光定量PCR，5個(gè)不同處理，12個(gè)取樣時(shí)間，2個(gè)器官，還要做內(nèi)參及重復(fù)，如何安排實(shí)驗(yàn)才能減小，每板之間對(duì)結(jié)果的誤差？ |
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2樓2013-03-12 23:13:09
cicelyzh
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【答案】應(yīng)助回帖
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machao8405: 金幣+2 2013-03-13 18:04:41
| 提好的RNA最好同時(shí)測(cè)濃度后反轉(zhuǎn)錄，反轉(zhuǎn)錄時(shí)要做master mix，這樣避免不同時(shí)間反轉(zhuǎn)的cDNA造成誤差。此外，如果是做相對(duì)定量的話，同一樣品的目的基因和內(nèi)參一定要同時(shí)跑。如果做絕對(duì)定量，板與板之間要做內(nèi)標(biāo)。 |
3樓2013-03-12 23:54:06
machao8405
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4樓2013-03-13 08:22:19
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5樓2013-03-13 08:23:16
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6樓2013-03-13 10:20:03
7樓2013-03-13 16:28:31
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