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盧爾夏鐵蟲 (初入文壇)
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[求助]
如何鑒定一個(gè)擬南芥完全未知的基因的功能
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| 這個(gè)基因有一些芯片數(shù)據(jù)和預(yù)測數(shù)據(jù),突變體也有表型(野生型是Col.0,,滲透處理和低pH處理長的突變體都比野生型差),但是不知道該從哪個(gè)方面入手。求大神指導(dǎo)~ |
木蟲 (著名寫手)
胖虎愛唱歌
| 根據(jù)我們實(shí)驗(yàn)室的思路,可以做real time PCR或者promoter:GUS看基因在哪些組織和器官表達(dá);可以構(gòu)建基因:GFP載體轉(zhuǎn)到擬南芥里看蛋白在細(xì)胞內(nèi)的定位,順便看可不可以complement mutant。如果可以,接下來用該植物提取蛋白,做IP或者克隆該基因通過yeast2hybrid找它的結(jié)合蛋白,從這里入手如果找到已知功能的結(jié)合蛋白就可以增加該蛋白的信息量了。找到結(jié)合蛋白可以通過各種方法來確定結(jié)合,然后看結(jié)合蛋白被knock out以后植物有沒有表型,根據(jù)不同的結(jié)果再做后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。 |

鐵蟲 (初入文壇)
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