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[求助]
如何鑒定一個擬南芥完全未知的基因的功能
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| 這個基因有一些芯片數(shù)據(jù)和預測數(shù)據(jù),突變體也有表型(野生型是Col.0,,滲透處理和低pH處理長的突變體都比野生型差),但是不知道該從哪個方面入手。求大神指導~ |
木蟲 (著名寫手)
胖虎愛唱歌
| 根據(jù)我們實驗室的思路,可以做real time PCR或者promoter:GUS看基因在哪些組織和器官表達;可以構建基因:GFP載體轉到擬南芥里看蛋白在細胞內的定位,順便看可不可以complement mutant。如果可以,接下來用該植物提取蛋白,做IP或者克隆該基因通過yeast2hybrid找它的結合蛋白,從這里入手如果找到已知功能的結合蛋白就可以增加該蛋白的信息量了。找到結合蛋白可以通過各種方法來確定結合,然后看結合蛋白被knock out以后植物有沒有表型,根據(jù)不同的結果再做后續(xù)的實驗。 |

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