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盧爾夏鐵蟲 (初入文壇)
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[求助]
如何鑒定一個擬南芥完全未知的基因的功能
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| 這個基因有一些芯片數(shù)據(jù)和預測數(shù)據(jù)，突變體也有表型（野生型是Col.0,，滲透處理和低pH處理長的突變體都比野生型差），但是不知道該從哪個方面入手。求大神指導~ |
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盧爾夏
鐵蟲 (初入文壇)
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zhaolf
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【答案】應(yīng)助回帖
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盧爾夏: 金幣+5, ★★★★★最佳答案 2013-04-07 14:27:12
xy656691: 金幣+10, 很好 2013-04-08 20:34:58
盧爾夏: 金幣+5, ★★★★★最佳答案 2013-04-07 14:27:12
xy656691: 金幣+10, 很好 2013-04-08 20:34:58
| 根據(jù)我們實驗室的思路，可以做real time PCR或者promoter：GUS看基因在哪些組織和器官表達；可以構(gòu)建基因：GFP載體轉(zhuǎn)到擬南芥里看蛋白在細胞內(nèi)的定位，順便看可不可以complement mutant。如果可以，接下來用該植物提取蛋白，做IP或者克隆該基因通過yeast2hybrid找它的結(jié)合蛋白，從這里入手如果找到已知功能的結(jié)合蛋白就可以增加該蛋白的信息量了。找到結(jié)合蛋白可以通過各種方法來確定結(jié)合，然后看結(jié)合蛋白被knock out以后植物有沒有表型，根據(jù)不同的結(jié)果再做后續(xù)的實驗。 |
5樓2013-04-04 15:29:20
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