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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 微生物 » 實驗/技術 » 細菌親緣關系疑問
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dayanxiang木蟲 (正式寫手)
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[求助]
細菌親緣關系疑問
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| 請問同一種不同菌株的16S rDNA 序列有沒有可能相似性只有87%？通常情況下沒有，有沒有特例，比如某些功能類群，非常感謝！ |
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molecula
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變異的可能性不大。變異必須在具備變異的條件下才會發(fā)生。打個比方：當菌體暴露在紫外線下面的時候，AT堿基發(fā)生水合反應，生成水合胸腺嘧啶。CG堿基發(fā)生點突變，生成C=C或者G=G的形式的錯配。如果沒有諸如紫外線、γ射線、其他類型的輻射源存在，同時沒有使用氯化銫、亞硝酸鹽環(huán)境的右邊，或者其他非常劇烈的惡劣環(huán)境的誘導，一般菌體，尤其是細菌，在冰箱的冷藏環(huán)境下，是很難發(fā)生突變反應的。 故此，我認為有兩點可能： 1：你送去測序的序列。如果是你自己PCR反應后，獲取的16S rDNA序列，那么，你在設計引物的時候，是直接選取了國際上 已經(jīng)公布的引物序列，還是自己設計的？如果是自己設計的，那么，你的設計可能并不是嚴格按照保守區(qū)域設計的。如果是用的國際上公布的簡并引物，那么，有可能是在測序的時候做了一個反應，造成反應不完全，你可以再次測序，這次你要求測序公司給你測通。 2：如果上述的一切步驟都沒有存在疑問。那么，唯一的可能就是菌體除了問題。要么，你買菌種的地方低溫冷凍干燥過程中沒有試駕合理的保護劑，造成具體DNA片段丟失。要么就是，那么郵寄的時候搞錯了。因為對方的菌體庫往往是同一菌種、相似菌種放在同一個庫里面，你問問對方給你郵寄的時候有沒有搞錯。 3：如果以上都沒有問題，那么，就是菌體真的發(fā)生了污染現(xiàn)象，這種污染有可能是菌體融合或者吞噬的過程。這個可能微乎其微！除非你運氣好到爆棚，這樣的情況足夠發(fā)一篇6以上的微生物文章了。這就是一個全新菌種了！ 你檢查過以上內容之后，告訴我一聲原因是什么。  |
dayanxiang9樓2013-03-21 13:38:52
liujianmin68
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2樓2013-03-20 08:04:31
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【答案】應助回帖
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zhangxingc: 金幣+5, 很好的應助 2013-03-20 09:20:18
dayanxiang: 金幣+5, ★★★很有幫助 2013-03-20 22:47:56
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dayanxiang: 金幣+5, ★★★很有幫助 2013-03-20 22:47:56
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一般情況下，同一種，不同菌株之間的差異絕對 不會超過4%！ 因為按照國際上的菌種分類學來講，當兩個菌株的16S rDNA的blast差異性超過了4%的時候，我們就可以進行生理生化測定，判定該菌株是否是新的小種。如果超過了8%的時候，基本上就可以判定兩個菌株不是同一個小種。如果超過了10%，我們就會認為是其他小種，兩個菌株之間的差異性橫豎不可能超過4%。這個基本上是一個默認的規(guī)矩。 |
3樓2013-03-20 08:31:10
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4樓2013-03-20 21:20:58
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