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gail3123鐵蟲 (初入文壇)
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[求助]
HPLC不出峰~求助~~
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各位大神~本人初識HPLC就碰到棘手的問題了…… 事情是這樣的…… 本人有一個樣品，其中目標物含量比較低，黃酮類，標準品在260nm，ODS色譜柱，甲醇-水（65:35），44分鐘出峰，但是樣品在44分鐘左右沒有峰。樣品中加入標準品在相同條件下出峰。于是考慮是大極性的雜質(zhì)峰過高把目標峰壓下去了，于是用聚酰胺除雜，但是還是沒有峰，ODS除雜，依舊沒有峰…… 請問，怎么能分出我要的峰呢~~不勝感謝�。�！ |
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xuewuhen2011
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2樓2013-03-22 17:32:00
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【答案】應(yīng)助回帖
★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
gail3123: 金幣+2, ★★★很有幫助, 謝謝，我試一下~~ 2013-03-23 11:07:40
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gail3123: 金幣+2, ★★★很有幫助, 謝謝，我試一下~~ 2013-03-23 11:07:40
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是不是你的待測成分的含量太低了，以至于測不到峰，是否將樣品濃縮或加大進樣量試試。再者黃酮采用聚酰胺除雜，是不是吸附強，目標成分未洗脫下來，未達到富集作用，反而造成損失？ “大極性的雜質(zhì)峰過高把目標峰壓下去了”，是指你的待測峰旁有個大的雜質(zhì)峰？但你的“樣品中加入標準品在相同條件下出峰”似乎雜質(zhì)峰并不影響目標峰的檢出。所以請你考慮一下樣品中目標成分的含量大小問題以及你自己的樣品取樣量是否能達到目標成分的檢出。前處理時是否采用的除雜手段不合適造成目標成分的損失。 |
3樓2013-03-23 00:02:14
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7樓2013-03-25 09:23:26
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