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gail3123鐵蟲 (初入文壇)
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[求助]
HPLC不出峰~求助~~
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各位大神~本人初識HPLC就碰到棘手的問題了…… 事情是這樣的…… 本人有一個樣品，其中目標(biāo)物含量比較低，黃酮類，標(biāo)準(zhǔn)品在260nm，ODS色譜柱，甲醇-水（65:35），44分鐘出峰，但是樣品在44分鐘左右沒有峰。樣品中加入標(biāo)準(zhǔn)品在相同條件下出峰。于是考慮是大極性的雜質(zhì)峰過高把目標(biāo)峰壓下去了，于是用聚酰胺除雜，但是還是沒有峰，ODS除雜，依舊沒有峰…… 請問，怎么能分出我要的峰呢~~不勝感謝�。�！ |
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xuewuhen2011
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2樓2013-03-22 17:32:00
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【答案】應(yīng)助回帖
★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
gail3123: 金幣+2, ★★★很有幫助, 謝謝，我試一下~~ 2013-03-23 11:07:40
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gail3123: 金幣+2, ★★★很有幫助, 謝謝，我試一下~~ 2013-03-23 11:07:40
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是不是你的待測成分的含量太低了，以至于測不到峰，是否將樣品濃縮或加大進(jìn)樣量試試。再者黃酮采用聚酰胺除雜，是不是吸附強(qiáng)，目標(biāo)成分未洗脫下來，未達(dá)到富集作用，反而造成損失？ “大極性的雜質(zhì)峰過高把目標(biāo)峰壓下去了”，是指你的待測峰旁有個大的雜質(zhì)峰？但你的“樣品中加入標(biāo)準(zhǔn)品在相同條件下出峰”似乎雜質(zhì)峰并不影響目標(biāo)峰的檢出。所以請你考慮一下樣品中目標(biāo)成分的含量大小問題以及你自己的樣品取樣量是否能達(dá)到目標(biāo)成分的檢出。前處理時是否采用的除雜手段不合適造成目標(biāo)成分的損失。 |
3樓2013-03-23 00:02:14
星星的眼睛
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7樓2013-03-25 09:23:26
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