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hsd3521主管區(qū)長(zhǎng) (知名作家)
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[交流]
色譜柱柱壓異常高，嘗試了多種辦法，請(qǐng)教高人
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柱子型號(hào)：Jupiter C4 reversed phase column (250 mm × 4.6 mm, 300 -sized pores, 5-μm sized particles) 進(jìn)樣：植物蛋白粗提液，過(guò)0.45膜 流動(dòng)相：70%水30%乙腈，結(jié)束試驗(yàn)后用100%乙腈沖洗 問(wèn)題：用了兩三天后，柱壓奇高，達(dá)到220左右，用100%乙腈沖洗，柱壓正常，在45-48之間 采取措施：超聲篩板，無(wú)用；反相沖洗，無(wú)用；低流速5%甲醇沖洗兩天后，采用流動(dòng)相仍在190左右 所以，在此請(qǐng)高人指點(diǎn)，如果操作，為什么100%乙腈沖洗時(shí)正常，柱子真得堵了嗎？ 附件是我在網(wǎng)上搜集的液相色譜柱的清洗與再生方法，感謝大家，在此分享[ Last edited by hsd3521 on 2013-3-26 at 07:53 ] |
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2013-03-26 07:53:31, 966.76 K
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crity328: 金幣+1, 感謝交流，歡迎常來(lái)~ 2013-03-24 14:53:08
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讓我猜一下，沒(méi)測(cè)過(guò)蛋白，但可能是如下原因： 1.你所分析的蛋白，在乙腈中溶解性好，但在水中，可能會(huì)析出，在你現(xiàn)在的色譜條件下，使用時(shí)間長(zhǎng)，肯定會(huì)堵柱。 建議接一個(gè)保護(hù)柱。 測(cè)試你的樣品的溶解性，溶于水嗎？ 柱壓高？真是柱的原因嗎？取下柱子，看看柱壓。 再說(shuō)低流速的甲醇水，5% 也有點(diǎn)太低了吧？雖然你的柱可以用水沖，但還是有機(jī)相比例高些好點(diǎn)吧...  |
2樓2013-03-24 10:55:46
hjcui
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3樓2013-03-24 11:02:30
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crity328: 金幣+1, 感謝交流，歡迎常來(lái)~ 2013-03-26 08:52:33
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一般已經(jīng)過(guò)了0.45的膜了就不應(yīng)該是樣品堵了柱子，但是如果用這個(gè)比例洗脫一直有問(wèn)題的話(huà)可以考慮換一下比例，還有，我認(rèn)為你檢查一下是不是有人用它做過(guò)別的，他們是不是有殘留，我就遇到過(guò)在檢測(cè)池那里出現(xiàn)殘留的問(wèn)題，用水就導(dǎo)致壓力增高，換成郵寄溶劑壓力就會(huì)正常，另外，你的壓力單位是什么？ 還有，如果壓力還在正常范圍內(nèi)就不要太擔(dān)心，能用就行唄。 |
6樓2013-03-24 15:06:47
devsts
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7樓2013-03-24 16:41:21
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19樓2013-03-27 11:42:37
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今天用了蛋白酶 柱壓流動(dòng)相時(shí)下降到了120 有點(diǎn)成效 21樓2013-03-27 20:45:49
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22樓2013-03-28 10:19:37
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[考研] 281求調(diào)劑 +9 | Koxui 2026-03-12 | 11/550 |
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[考研] 0703化學(xué)求調(diào)劑 +7 | 綠豆芹菜湯 2026-03-12 | 7/350 |
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[考研] 314求調(diào)劑 +7 | 無(wú)懈可擊的巨人 2026-03-12 | 7/350 |
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[考研] 270求調(diào)劑 085600材料與化工專(zhuān)碩 +3 | YXCT 2026-03-11 | 3/150 |
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