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為什么單酶切切不開(kāi)
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| 最近最轉(zhuǎn)基因用的Super1300載體,選HindIII和Spe1 酶雙酶切后和目的片段連接,但是總是空載,自連,沒(méi)辦法,單酶切驗(yàn)證發(fā)現(xiàn)Spe1酶切不開(kāi),HindIII沒(méi)問(wèn)題,可以確定不是酶的問(wèn)題,因?yàn)橛脛e人切其他質(zhì)粒沒(méi)問(wèn)題的Spe1酶切的,但是切我的空載都不行,另外想著換 酶切位點(diǎn),拿其他酶試了一下,也能切開(kāi),但是SpeI就是切不開(kāi),和空載的條帶一樣!一直弄不明白怎么回事,我用的NEB酶,看NEB目錄說(shuō)這個(gè)酶對(duì)甲基化并不敏感啊,怎么回事???誰(shuí)能救救我! |

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