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nick.nye-0313銅蟲 (小有名氣)
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[求助]
求心肌組織總蛋白提取注意事項
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| 求心肌組織總蛋白提取注意事項,我們用凱基的全蛋白提取盒,使用液氮研碎心肌組織,后加入裂解液,用細胞破碎儀超聲(冰水上操作),離心取上清。我想問有么有人用同樣的方法提取總蛋白,有的話能否介紹一下經(jīng)驗。超聲多久,功率多大,如何超聲才能使細胞破碎的好且又 不至于使蛋白變性。我取心肌組織30mg,加入250ulLysis buffer, 我每次超一下(超半秒),一組樣本輪回超3輪,然后10000轉(zhuǎn)離心5分鐘取上清?墒亲鯽cting發(fā)現(xiàn)不齊。是定量的問題還是,蛋白沒提出來?希望大蝦指教。!不勝感激! |


木蟲 (初入文壇)
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