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fu-guo-laing新蟲 (初入文壇)
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誘導(dǎo)表達(dá)GST融合蛋白,結(jié)果分子量少了26KD,剛好是GST的分子量
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將目的基因插入到pGEX-4T-1載體上,然后將構(gòu)建好的重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化入BL21(DE3)感受態(tài)細(xì)胞中,用終濃度為0.25mM的IPTG誘導(dǎo)表達(dá)6h。目的基因25KD,本來用IPTG誘導(dǎo)后應(yīng)該表達(dá)的融合蛋白約為51KD,但是很奇怪,在進(jìn)行SDS-PAGE時(shí),在25KD處出現(xiàn)很明顯的條帶,而51KD處卻無明顯條帶。貌似是GST被自動切除了,或者是啟動子跳過GST而直接翻譯目的基因了?這是什么原因呀,百思不得其解???測序表明重組質(zhì)粒是沒有錯(cuò)誤的。。。 |
金蟲 (小有名氣)
新蟲 (初入文壇)
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