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sys0610

銅蟲 (初入文壇)

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[求助] 請(qǐng)教cDNA-AFLP的定量問題

我在做cDNA-AFLP，反轉(zhuǎn)錄用的TAKARA的試劑盒要求加2μg Template RNA，而mRNA只占Total RNA的不到1~4%，純化用的Promega的試劑盒純化效率好像也不是很高。我現(xiàn)在需要定量cDNA。所以想請(qǐng)教：
1.如果反轉(zhuǎn)錄加2μg，我第一步提的Total RNA定量應(yīng)該多少？是按mRNA的含量算要50~200μg嗎？不靠譜吧？
2.如果RNA沒定量，cDNA怎么定量？含量太少了，除了測(cè)定吸光度值，有更好的方法嗎？
3.非要測(cè)吸光度值的話，和RNA一樣測(cè)OD260/OD280嗎？濃度計(jì)算公式也是一樣的嗎？

沒有在做cDNA-AFLP的嗎？還是我這問題不值得回答？

求賜教~~~�。�！

謝謝

[ Last edited by sys0610 on 2013-5-10 at 15:27 ]

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1樓 2013-04-24 21:37:33

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