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北京石油化工學(xué)院2026年研究生招生接收調(diào)劑公告

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cqqxmc

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[求助] western與抗體

各位高手：
我用同一種自制的抗體做了ELISA和western,
其中ELISA中該抗體可以正常檢測(cè)樣品帶毒率；
但在western中卻雜不出目的條帶。（樣品為帶毒的昆蟲(chóng)或植物）
不知道是不是因?yàn)榈鞍鬃冃院蟛荒鼙辉摽贵w識(shí)別？
求分析！求解決辦法！

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1樓 2013-05-03 17:07:20

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guxinhan123

銀蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)

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cqqxmc(gyesang代發(fā)): 金幣+1, 鼓勵(lì)回帖應(yīng)助！ 2013-05-04 01:33:50
cqqxmc: 金幣+1, ★有幫助 2013-05-04 13:53:00

能做ELISA不能做western正常的，優(yōu)化下wb的條件，應(yīng)該是抗體的問(wèn)題，加大抗體用量和上樣量，先不管雜帶，如果還是不能用就果斷換抗體吧

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2樓2013-05-03 21:58:07

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cicelyzh

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【答案】應(yīng)助回帖

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cqqxmc: 金幣+1, ★有幫助 2013-05-04 13:53:24

抗體一般是識(shí)別蛋白表面的抗原決定簇，一般在變性條件下識(shí)別效果會(huì)更好。有的抗體在native條件下反而識(shí)別不理想。此外，你自制的抗體沒(méi)有做western如何判斷抗體的特異性？

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3樓2013-05-04 00:50:37

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引用回帖:

3樓: Originally posted by cicelyzh at 2013-05-04 00:50:37
抗體一般是識(shí)別蛋白表面的抗原決定簇，一般在變性條件下識(shí)別效果會(huì)更好。有的抗體在native條件下反而識(shí)別不理想。此外，你自制的抗體沒(méi)有做western如何判斷抗體的特異性？

抗體是從別的實(shí)驗(yàn)室要來(lái)的

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4樓2013-05-04 13:53:56

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今天又換了一種抗體，終于雜出了條帶

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5樓2013-05-04 14:28:58

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引用回帖:

4樓: Originally posted by cqqxmc at 2013-05-04 13:53:56
抗體是從別的實(shí)驗(yàn)室要來(lái)的...

那他們肯定做過(guò)western的，你可以問(wèn)一下稀釋建議，然后自己再根據(jù)實(shí)驗(yàn)室條件優(yōu)化一下。

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6樓2013-05-05 01:54:06

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