 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 2 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 923 | 回復(fù): 1 | ||
374695805新蟲 (初入文壇)
|
[求助]
DNA洗滌沉淀
|
|
（一）DNA和載體經(jīng)T4 Ligase連接以后要進(jìn)行電轉(zhuǎn)化，所以連接體系要純化，步驟如下： (1)加入2.5 μl（1/10量）的3 M CH3COONa（pH5.2）。 (2)加入62.5 μl（2.5倍量）的冷無水乙醇，-20℃放置30～60分鐘。 (3)離心回收沉淀，用70％的冷乙醇清洗沉淀，真空干燥。 (4)25～50 μl TE溶解，10～20 μl轉(zhuǎn)化至100 μl的感受態(tài)細(xì)胞中。 之前做了幾次連接和電轉(zhuǎn)化，都沒有成功，陽性對照轉(zhuǎn)化了，陰性對照沒轉(zhuǎn)化，連接產(chǎn)物也沒轉(zhuǎn)化，估計洗滌沉淀過程中把連接產(chǎn)物連同上層溶液一起倒掉去除。（電轉(zhuǎn)化過程中的放電時間一般介于4~5ms左右，但是連接產(chǎn)物的放電時間跟上述時間有較大差異，相差2個數(shù)量級）。 請問，第(3)步中，離心回收沉淀，由于DNA用肉眼根本看不到，怎樣保證棄去上層溶液的時候不會把管底的DNA沉淀一起倒掉�。壳缶唧w的操作要點！ （二）分布雙酶切的具體步驟是什么？切完一個之后用什么方法純化？純化試劑盒還是和上述（一）所提到的洗滌沉淀？ |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
不合理蛙科研實驗中的趣事：實驗器材的 “烏龍”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗中的趣事：和實驗材料的 “斗智斗勇”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤色/翻譯怎么收費?
已經(jīng)有119人回復(fù)
-
蛋白質(zhì)檢測：精準(zhǔn)分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之小鼠實驗：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計，解析生命機(jī)制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之重金屬檢測：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之“蛙測重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
» 本主題相關(guān)商家推薦: (我也要在這里推廣)
» 本主題相關(guān)價值貼推薦，對您同樣有幫助:
- DNA純化試劑盒原理
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 在用CTAB法提取曲霉總DNA時，提取很多次沒有成功，期望大家多多幫助。
已經(jīng)有16人回復(fù)
- 用乙醇沉淀多糖或蛋白時加入鹽的濃度
已經(jīng)有3人回復(fù)
- 細(xì)菌基因組DNA提取 交流
已經(jīng)有18人回復(fù)
- 誰做過乙醇沉淀法濃縮DNA呀？離心之后能用肉眼看到DNA嗎？
已經(jīng)有24人回復(fù)
- 動植物樣品的采集及DNA樣品的提取(ZT)
已經(jīng)有10人回復(fù)
- 提取DNA的過程中如何有效的除去蛋白質(zhì)
已經(jīng)有7人回復(fù)
- DNA的提取簡介，包括法醫(yī)DNA的提取方法！
已經(jīng)有54人回復(fù)
- 質(zhì)粒提取
已經(jīng)有22人回復(fù)
- 提取大腸桿菌質(zhì)粒失敗的原因
已經(jīng)有11人回復(fù)
- 【求助/交流】提基因組DNA，加了異丙醇沒有DNA析出~~~
已經(jīng)有13人回復(fù)
- 【求助/交流】異丙醇沉淀DNA
已經(jīng)有24人回復(fù)
- 【求助/交流】求動物組織DNA提取方法
已經(jīng)有8人回復(fù)
- 【求助/交流】細(xì)菌基因組DNA的提取法（CTAB/NaCl 法）,提取的DNA是否為細(xì)菌總DNA? 非?/a>
已經(jīng)有11人回復(fù)
- DNA的沉淀問題
已經(jīng)有10人回復(fù)
cicelyzh
鐵桿木蟲 (職業(yè)作家)
- MolEPI: 10
- 應(yīng)助: 1662 (講師)
- 金幣: 8693.8
- 紅花: 72
- 帖子: 3516
- 在線: 456小時
- 蟲號: 1614001
- 注冊: 2012-02-13
- 專業(yè): 生物化學(xué)
2樓2013-05-09 02:22:33
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 374695805 的主題更新
| 2 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 材料292調(diào)劑 +6 | 橘頌思美人 2026-03-23 | 6/300 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 0856材料專碩353求調(diào)劑 +5 | NIFFFfff 2026-03-20 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 環(huán)境學(xué)碩288求調(diào)劑 +8 | 皮皮皮123456 2026-03-22 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 一志愿國科過程所081700，274求調(diào)劑 +3 | 三水研0水立方 2026-03-23 | 3/150 |
|
|
[考研] 307求調(diào)劑 +3 | 余意卿 2026-03-21 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 石河子大學(xué)（211、雙一流）碩博研究生長期招生公告 +3 | 李子目 2026-03-22 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 287求調(diào)劑 +8 | 晨昏線與星海 2026-03-19 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 324求調(diào)劑 +6 | lucky呀呀呀鴨 2026-03-20 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 289求調(diào)劑 +7 | 懷瑾握瑜l 2026-03-20 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +5 | Zhangbod 2026-03-21 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 考研調(diào)劑 +4 | 來好運來來來 2026-03-21 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 0703化學(xué)調(diào)劑 +4 | 妮妮ninicgb 2026-03-21 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 299求調(diào)劑 +5 | shxchem 2026-03-20 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 324分 085600材料化工求調(diào)劑 +4 | llllkkkhh 2026-03-18 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 一志愿華南師大 070300（化學(xué)）304分求調(diào)劑 +3 | 0703武芊慧雪304 2026-03-18 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 295求調(diào)劑 +4 | 一志愿京區(qū)211 2026-03-18 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 一志愿武漢理工材料工程專碩調(diào)劑 +9 | Doleres 2026-03-19 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 中南大學(xué)化學(xué)學(xué)碩337求調(diào)劑 +3 | niko- 2026-03-19 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 0817 化學(xué)工程 299分求調(diào)劑 有科研經(jīng)歷 有二區(qū)文章 +22 | rare12345 2026-03-18 | 22/1100 |
|
|
|
[考研] 353求調(diào)劑 +3 | 拉鉤不許變 2026-03-20 | 3/150 |
|