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球球愛(ài)跳鐵蟲(chóng) (小有名氣)
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[求助]
關(guān)于pcr產(chǎn)物的聚丙烯凝膠電泳
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 我現(xiàn)在在做多重pcr產(chǎn)物的聚丙烯凝膠電泳，找到的配方：試劑 12% 30%丙烯酰胺溶液（ml）16.6 水（ml） 40 5×TBE（ml） 20 10%過(guò)硫酸銨（ml） 0.7 TEMED（ml） 0.035 1配制需要10ml左右是不是可以等量減少��？ 2據(jù)說(shuō)跑膠之前產(chǎn)物要變性成單鏈對(duì)嗎？ 3跑膠的那個(gè)marker 是不是就不能用跑瓊脂糖電泳時(shí)用的marker了 請(qǐng)大師們指點(diǎn)一下吧， |
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不轉(zhuǎn)錄的DNA
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【答案】應(yīng)助回帖
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樓主，從你的問(wèn)題中，就能看出你很少做聚丙烯凝膠電泳！我猜的對(duì)吧？ 聚丙烯酰胺凝膠可以精確到各位數(shù)堿基的DNA電泳！一般瓊脂糖分離不出來(lái)，我們才選擇聚丙烯酰胺凝膠···· 1. 你的配方是可以等量遞增或遞減的！只要他的比例沒(méi)有變化就行！ 2. 樣品的處理與不處理！關(guān)鍵看你跑的是單鏈的還是雙鏈的？單鏈的就要處理，雙鏈的就不用處理了！一般跑DNA的聚丙烯酰胺凝膠不用加熱處理！ 3.應(yīng)該是不能用的，聚丙烯酰胺凝膠和瓊脂糖凝膠在DNA分離方面分離范圍是不同的！所以選擇合適的Marker是關(guān)鍵！ |
2樓2013-05-16 13:05:57
球球愛(ài)跳
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3樓2013-05-16 19:03:36
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4樓2013-05-16 19:06:57
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