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時(shí)光之沙

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[交流] 【討論】關(guān)于溶出度試驗(yàn)中過濾的作用。

我近期在用HPLC做溶出曲線的過程中遇到了樣品降解的問題，而且同一杯中不同時(shí)間點(diǎn)出現(xiàn)了不同程度無規(guī)律的降解現(xiàn)象。在分析降解原因的過程中，考慮到變化因素只有樣品瓶和濾膜，現(xiàn)在正在排除這兩個(gè)原因。在此過程中，有位老師建議不過濾直接進(jìn)樣，因?yàn)橛蓄A(yù)柱，所以輔料堵柱子的情況可以得到緩解。由此我考慮到，過濾程序是否可以被移除？作用是否只是用來濾掉輔料？
===============以上是故事背景===================
---------------------------下面是正式討論部分----------------------------------
各位在做溶出的過程中一定都了解溶出試驗(yàn)中“30秒內(nèi)完成過濾”這個(gè)試驗(yàn)要點(diǎn)。那么到底為什么要過濾？為什么要30秒內(nèi)完成？我認(rèn)為主要有以下兩點(diǎn)：
1，濾除輔料：濾掉輔料可以防止HPLC法輔料堵塞柱子，還可以防止紫外法輔料影響吸收度的問題。
2，終止溶出行為：我認(rèn)為這一點(diǎn)才是溶出過程中過濾的重要性。我百度了一下，大多數(shù)人都只提到了過濾除去輔料，那么為什么除去輔料一定要在30秒內(nèi)完成過濾不可？輔料存在于溶液中不會(huì)繼續(xù)溶解，即使晚一些過濾其實(shí)也沒有問題。所以，過濾應(yīng)該是為了濾掉還沒來得急溶解掉的固體樣品，從而終止溶出行為，以達(dá)到測(cè)量“某一固定時(shí)間點(diǎn)溶出程度”的目的。
假設(shè)我們不去過濾，理論上，我猜測(cè)，還沒有溶解的樣品依然存在于已經(jīng)取出的樣品瓶中，即使條件發(fā)生了變化（與杯內(nèi)的攪拌與溫度相比之下），也不可預(yù)知樣品是否會(huì)繼續(xù)溶解（脫離攪拌與37攝氏度的條件，樣品也有繼續(xù)溶解的可能）。使曲線中該時(shí)間點(diǎn)的溶出度脫離了真實(shí)情況。由此，我們測(cè)定的結(jié)果中就會(huì)引入不確定因素，致使結(jié)果不可信。
++++++++++++++++這些是我的個(gè)人理解與思考++++++++++++++++
/////////////////////////////以下是討論問題\\\\\\\\\\\\\\\\\\\\\\\\\\\\\\\\\\\\
1，溶出過程中過濾過程的原因？
2，過濾程序是否可以被移除？
3，關(guān)于微粉化與濾膜：近期在了解微粉化的問題，據(jù)我了解，某些技術(shù)已經(jīng)可以達(dá)到0.1微米的微粉化技術(shù)。而現(xiàn)在市面存在的濾膜只有0.45與0.8微米的濾膜。如果我以上的考慮是正確的，那么如何解決濾膜濾不掉微粉化的主藥這個(gè)問題?微粉化的制劑在做溶出度的時(shí)候是否會(huì)遇到這個(gè)技術(shù)問題？一旦產(chǎn)生，如何解決?

[ Last edited by 時(shí)光之沙 on 2013-5-31 at 09:18 ]

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1樓 2013-05-18 10:38:42

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過濾是必須的，不是色譜級(jí)的溶液是不能直接進(jìn)入液相的，其實(shí)就是防止長(zhǎng)期進(jìn)含微小顆粒的樣品堵住過濾片，造成系統(tǒng)壓力大，損傷柱子或者泵頭。溶出過濾的目的我認(rèn)為的和你差不多，肯定是過濾的越快越好，防止有沒有溶解的主藥繼續(xù)釋放，微粉化我覺得不用考慮，能過膜的微粉進(jìn)入液相也是不會(huì)損害儀器的，最怕的是影響主峰，其實(shí)只要微粉化的輔料出峰不影響你的主藥封不用管它，因?yàn)槟愕娜艹鼋橘|(zhì)不也是會(huì)出峰的嗎，不損害儀器，不影響結(jié)果。

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4樓2013-05-18 12:22:47

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2樓2013-05-18 10:54:30

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時(shí)光之沙: 金幣+1, 謝謝提供問題 2013-05-24 10:58:16

我覺得過濾還有兩個(gè)問題:一是過濾采用的那種濾膜,雖然都是0.45um的，但濾膜不同,過濾效果不一樣.例如Whatman GF/D與GF/F；二是是否棄去初濾液的問題。

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5樓2013-05-20 10:22:25

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4樓: Originally posted by njkinghu at 2013-05-18 12:22:47
過濾是必須的，不是色譜級(jí)的溶液是不能直接進(jìn)入液相的，其實(shí)就是防止長(zhǎng)期進(jìn)含微小顆粒的樣品堵住過濾片，造成系統(tǒng)壓力大，損傷柱子或者泵頭。溶出過濾的目的我認(rèn)為的和你差不多，肯定是過濾的越快越好，防止有沒有溶 ...

我的意思不是微粉化的輔料，是微粉化的主藥，一旦過濾不出去，留在溶液中，那么在進(jìn)樣之前的這段時(shí)間仍然在繼續(xù)溶出，是會(huì)影響溶出曲線的。

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7樓2013-05-24 10:49:58

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5樓: Originally posted by shanshui7163 at 2013-05-20 10:22:25
我覺得過濾還有兩個(gè)問題:一是過濾采用的那種濾膜,雖然都是0.45um的，但濾膜不同,過濾效果不一樣.例如Whatman GF/D與GF/F；二是是否棄去初濾液的問題。

GF／A-高效常規(guī)過濾紙。適合于收集各種水中的懸浮物，過濾水中的顆粒、藻類和細(xì)菌培養(yǎng)液等。并且廣泛地應(yīng)用于空氣污染監(jiān)測(cè)。GF／B-比GF／A厚，濕強(qiáng)度更高，負(fù)載力亦更強(qiáng)。推薦用于濃縮細(xì)小顆粒狀的懸浮物和每平方厘米含水量高達(dá)68．5毫克的特別技術(shù)需求。適合于工業(yè)污水中大量懸浮物的收集。GF／C-是常規(guī)水中懸浮物測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)方法中指定用濾紙，也用于溶劑的澄清和細(xì)菌培養(yǎng)液過濾。在生化方面廣泛用于細(xì)胞收集、液閃計(jì)數(shù)和結(jié)合分析測(cè)驗(yàn)GF／D- —般用于預(yù)濾，負(fù)載力強(qiáng)。GF／F-細(xì)微顆粒的過濾保留率極高。適用于要求較嚴(yán)格的應(yīng)用如沙門菌和綠膿桿菌、蛋白溶液的過濾、HPLC分析前的樣品和溶劑過濾。
=======================
以上是網(wǎng)絡(luò)資料，你說的膜沒有用過，我用的都是國(guó)產(chǎn)木有牌子的膜。

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8樓2013-05-24 10:59:42

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asdry

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時(shí)光之沙: 金幣+1, 謝謝 2013-05-24 13:11:28

祝樓主諸事順利，心想事成！

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9樓2013-05-24 11:19:10

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10樓2013-05-31 09:18:55

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swallow13

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時(shí)光之沙: 金幣+2, 謝謝參與 2013-06-01 07:08:27

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11樓2013-05-31 09:32:41

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11樓: Originally posted by swallow13 at 2013-05-31 09:32:41
對(duì)于微粉化的主藥我的理解是可以采用高速離心取上清液進(jìn)樣

具有一定可行性，但仍不能解決樣品在離心過程中溶解的問題。離心少說也要3-5分鐘，即使有離心力的作用，但還是不能停止溶解的現(xiàn)象發(fā)生。
就如仿制藥要求在15分鐘溶出度達(dá)到85%即可不用比較F2因子，但是沒有立即過濾，而是3分鐘以上的離心操作，是否能夠讓專家信服？

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12樓2013-06-01 07:08:09

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ppandonghui6樓

2013-05-20 11:03 回復(fù)

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