 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 5729 | 回復(fù): 51 | ||||
| 當(dāng)前只顯示滿足指定條件的回帖，點擊這里查看本話題的所有回帖 | ||||
sherrysure銀蟲 (小有名氣)
|
[求助]
我的蛋白序列鑒定都是正確的，可是為什么就是不表達(dá)，是為什么呢？附SDS-PAGE圖
|
|||
|
這3個月一直在做蛋白表達(dá)， 但是一直沒有成功。 我是這樣做的： 把擴(kuò)增出來的目的條帶連接到pMD18TSimple，轉(zhuǎn)化到Top10； 選擇PCR與測序鑒定結(jié)果都正確的陽性菌液，提質(zhì)粒，酶切，回收目的條帶； 酶切后目的條帶連接到pET30a載體，轉(zhuǎn)化到Rosetta； 菌液PCR和測序鑒定結(jié)果正確的陽性菌液擴(kuò)大培養(yǎng)，在0、2、4、6、8h取樣做SDS-PAGE； 得到的結(jié)果就是沒有結(jié)果  期間也試過以下表達(dá)載體：pET28b、pET30a、pET32a 選擇的酶切位點是BamHI、XhoI，都對應(yīng)載體圖譜數(shù)過，不會存在移碼的問題。 分別也都嘗試過感受態(tài)：BL21、Rosetta 但是結(jié)果都是不表達(dá)，跑出來與上面類似的圖 迫切尋求幫助，請求高手指導(dǎo)~~感激不盡！ page.jpg [ Last edited by sherrysure on 2013-6-6 at 14:47 ] |
回復(fù)此樓» 收錄本帖的淘帖專輯推薦
 核酸生物學(xué)實驗經(jīng)驗 | 蛋白質(zhì)生物學(xué)實驗經(jīng)驗 |
» 猜你喜歡
不合理蛙科研實驗之小鼠實驗：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計，解析生命機(jī)制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之重金屬檢測：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤色/翻譯怎么收費(fèi)?
已經(jīng)有106人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之“蛙測重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
留學(xué)--博士招生
已經(jīng)有16人回復(fù)
-
化學(xué)工程，本211，求調(diào)劑，ab區(qū)不限
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
邵陽學(xué)院食品與化學(xué)工程學(xué)院碩士調(diào)劑
已經(jīng)有0人回復(fù)
» 本主題相關(guān)價值貼推薦，對您同樣有幫助:
- 如果在NCBI上查得的序列是某個蛋白mRNA的partial cds，那能做克隆表達(dá)嗎
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 序列比對軟件的選擇和進(jìn)化樹制作
已經(jīng)有9人回復(fù)
- 目的蛋白序列連接pet15b測序結(jié)果正確為何不表達(dá)
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 蛋白氨基酸序列分析及二、三、四級結(jié)構(gòu)的鑒定
已經(jīng)有33人回復(fù)
cynthia8225
新蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 4 (幼兒園)
- 金幣: 210.4
- 散金: 15
- 紅花: 1
- 帖子: 98
- 在線: 32.2小時
- 蟲號: 1836651
- 注冊: 2012-05-27
- 性別: MM
- 專業(yè): 微生物遺傳育種學(xué)
9樓2013-06-07 22:09:39
linxt2005
金蟲 (小有名氣)
- MolEPI: 1
- 應(yīng)助: 40 (小學(xué)生)
- 金幣: 1250.3
- 紅花: 2
- 帖子: 185
- 在線: 141.1小時
- 蟲號: 2062910
- 注冊: 2012-10-15
- 性別: GG
- 專業(yè): 蛋白質(zhì)組學(xué)
2樓2013-06-06 16:48:10
sherrysure
銀蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 1117.5
- 散金: 8
- 紅花: 2
- 帖子: 121
- 在線: 82.4小時
- 蟲號: 1285648
- 注冊: 2011-05-04
- 專業(yè): 獸醫(yī)寄生蟲學(xué)
3樓2013-06-06 18:20:27
xiaoweiwei121
榮譽(yù)版主 (文壇精英)
這潭水藍(lán)的深邃
- MolEPI: 5
- 應(yīng)助: 18 (小學(xué)生)
- 貴賓: 39.097
- 金幣: 106416
- 散金: 2773
- 紅花: 197
- 沙發(fā): 109
- 帖子: 35580
- 在線: 2157.8小時
- 蟲號: 426591
- 注冊: 2007-07-28
- 性別: MM
- 專業(yè): 蛋白質(zhì)組學(xué)
- 管轄: 蟲友互識
4樓2013-06-06 23:59:39
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 化學(xué)0703 調(diào)劑 306分 一志愿211 +4 | 26要上岸 2026-03-28 | 4/200 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 一志愿南昌大學(xué)324求調(diào)劑 +7 | hanamiko 2026-03-27 | 7/350 |
|
|
|
[考研]
 材料與化工考研調(diào)劑
+17
|
孅華 2026-03-22 | 17/850 |
|
|
|
[考研] 085404求調(diào)劑，總分309，本科經(jīng)歷較為豐富 +4 | 來財aa 2026-03-25 | 4/200 |
|
|
|
[有機(jī)交流]
高溫高壓反應(yīng)求助
 10+4
|
chibby 2026-03-25 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 265求調(diào)劑11408 +3 | 劉小鹿lu 2026-03-27 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 272求調(diào)劑 +7 | 腳滑的守法公民 2026-03-27 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 286求調(diào)劑 +4 | lim0922 2026-03-26 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 調(diào)劑求收留 +7 | 果然有我 2026-03-26 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 調(diào)劑 +4 | 柚柚yoyo 2026-03-26 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 機(jī)械學(xué)碩310分，數(shù)一英一，一志愿211本科雙非找調(diào)劑信息 +3 | @357 2026-03-25 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 一志愿北京化工大學(xué)材料與化工（085600）296求調(diào)劑 +9 | 稻妻小編 2026-03-26 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 086000生物與醫(yī)藥292求調(diào)劑 +6 | 小小陳小小 2026-03-22 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 一志愿南航 335分 | 0856材料化工 | GPA 4.07 | 有科研經(jīng)歷 +6 | cccchenso 2026-03-23 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 340求調(diào)劑 +5 | 話梅糖111 2026-03-24 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 300分，材料，求調(diào)劑，英一數(shù)二 +5 | 超贊的 2026-03-24 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 277分求調(diào)劑，跨調(diào)材料 +3 | 考研調(diào)劑lxh 2026-03-24 | 3/150 |
|
|
|
[考研]
 085404電子信息284分求調(diào)劑
+4
|
13659058978 2026-03-24 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 361求調(diào)劑 +3 | Glack 2026-03-22 | 3/150 |
|
|
|
[考研]
一志愿070300浙大化學(xué)358分，求調(diào)劑！
+4
|
酥酥魚.. 2026-03-21 | 4/200 |
|