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[求助]
多糖的除蛋白問題
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| 大家好： 想問大家一個問題，我在對水提的蟲草多糖進行除蛋白時，除蛋白前紫外檢測的時候200-400nm之間沒有峰吸收 ，曲線很平穩(wěn)，只是快要到200即接近縱軸的時候曲線急劇的上升。之后我又用胰蛋白酶處理了三次，離心時有少量的白色沉淀，然后我又用savege法處理了4次，此時中間層看不到有白色絮狀物，我認為蛋白除干凈了，可紫外的時候曲線形狀和除蛋白前一樣，沒有變化，只是在260nm和280nm處的吸光度變大了。之前我的材料用80%的乙醇回流提取過，可是我查了80%的乙醇只能除去一些色素、小分子的化合物、單糖和一些低聚糖等，不會除去蛋白的呀，處理前和處理后分別茚三酮顏色反應(yīng)也不明顯，要說沒有蛋白不可能的呀，那我savege法處理的時候中間那絮狀物是什么呀？是不是我操作錯了還是？希望有做過的同仁們能給指點一下，麻煩大家了！ |
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送紅花一朵 |
非常謝謝，我把多糖溶解在水里，我沒有木瓜蛋白酶，用的是胰蛋白酶，它的水解條件好像是PH=7.8-8.1，我沒有調(diào)節(jié)PH，直接在50℃水浴4小時，酶法我處理了3次，然后4次SEVAG法處理，就看不到變性蛋白了，而且我的溶液顏色還淺了很多，透亮透亮的，我想問下此法是不是還可以出去部分色素，還是我的糖少了？我昨天重復(fù)做了一遍，除蛋白前260nm和280nm處有峰，很小，除蛋白后平了很多，是不是證明蛋白除去了很多？還是要求此處的吸收度要小于某個值？我的縱坐標最大值設(shè)置的是2.5，這個縱坐標最大值設(shè)置有什么具體的規(guī)定嗎？非常謝謝！ |
5樓2013-06-21 16:46:51
2樓2013-06-20 11:11:53
3樓2013-06-20 20:40:44
藍龍教主
金蟲 (正式寫手)
- 應(yīng)助: 56 (初中生)
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- 專業(yè): 天然藥物化學(xué)
4樓2013-06-20 23:35:55
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