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北京石油化工學(xué)院2026年研究生招生接收調(diào)劑公告

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dewdan

新蟲(chóng) (初入文壇)

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[求助] PCR總是出現(xiàn)好多突變?cè)趺崔k啊

PCR擴(kuò)增cDNA連到t載體后測(cè)序結(jié)果總是有很多突變?cè)趺崔k�。�？1800bp就有十幾個(gè)突變，翻譯成氨基酸也是有八九個(gè)突變，用的是phusion酶啦，郁悶……求各位高手指點(diǎn)

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1樓 2013-06-23 16:32:17

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Haibara_Ai

銅蟲(chóng) (小有名氣)

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Phusion 1800bp十幾個(gè)突變基本不可能的。。

LZ你的測(cè)序結(jié)果圖譜怎么樣？用幾個(gè)引物測(cè)得序？不同克隆突變有一致性么？

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7樓2013-06-24 03:46:57

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xwchen24

金蟲(chóng) (小有名氣)

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myprayer: 金幣+1, Gifts of roses, hand there are lingering fragrance. Look forward to your wonderful and more detailed answer. 2013-06-23 20:00:36

樓主需要優(yōu)化反應(yīng)體系,,,根據(jù)phusion的說(shuō)明書(shū)來(lái)，，或者有可能使SNP,,,

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2樓2013-06-23 17:12:46

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tongyanna

金蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)

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專業(yè): 水產(chǎn)生物遺傳育種學(xué)

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myprayer: 金幣+1, Gifts of roses, hand there are lingering fragrance. Look forward to your wonderful and more detailed answer. 2013-06-23 20:00:44

高保真酶也有一定的錯(cuò)配，要不優(yōu)化體系要不換換其他更高級(jí)的高保真酶！

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自己的路，自己快樂(lè)的走

3樓2013-06-23 18:47:43

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zhaodahe

木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)

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1949stone: 金幣+1, 同意 2013-06-24 07:57:18

換高保真酶，反應(yīng)體系盡量標(biāo)準(zhǔn)，也能提高準(zhǔn)確性。

[ 發(fā)自手機(jī)版 http://www.gaoyang168.com/3g ]

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4樓2013-06-23 19:18:13

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普通表情龍兔虎貓

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