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北京石油化工學(xué)院2026年研究生招生接收調(diào)劑公告

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xrj315

銅蟲(chóng) (初入文壇)

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[求助] 噬菌體文庫(kù)PCR擴(kuò)增擴(kuò)不出片段已有1人參與

噬菌體文庫(kù)擴(kuò)增前PCR很多長(zhǎng)片段，擴(kuò)增之后過(guò)了一段時(shí)間PCR長(zhǎng)片段幾乎沒(méi)有（剛擴(kuò)增完也還好），而且擴(kuò)增出很多亮度很差的小片段，只有100~200左右，但可以確定不是引物二聚體，做過(guò)對(duì)照（第二張圖），噬菌體的滴度沒(méi)有變化。求大神指導(dǎo)，是我做法有問(wèn)題還是都這種現(xiàn)象？

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左手挽著埃蒙斯，右手卻被吉倫哈爾拖向了深淵......

1樓 2013-06-23 18:51:42

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yujian6135

金蟲(chóng) (小有名氣)

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您好。請(qǐng)問(wèn)這個(gè)引物是根據(jù)那些基因設(shè)計(jì)的？我想做一下侵染大腸菌菌BL21的噬菌體基因鑒定，不知道怎么設(shè)計(jì)引物，麻煩指點(diǎn)一下。謝謝～～

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5樓2018-12-05 11:40:39

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linyingjia

至尊木蟲(chóng) (職業(yè)作家)

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我也有這個(gè)問(wèn)題啊。噬菌體裂解液直接pcr也和你的第一個(gè)圖差不多。我買(mǎi)的是millipore的pre made-t7 select噬菌體。
做到第4輪篩選后，挑取噬菌斑頂層培養(yǎng)基，按照說(shuō)明書(shū)做的，pcr沒(méi)有出帶。
只在100bp左右位置有印。

你的解決了嘛？

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2樓2014-04-25 21:56:22

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acast

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你好樓主這個(gè)問(wèn)題解決了嗎

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&amp;amp;amp;amp;quot;Hope&amp;amp;amp;amp;quot;and&amp;amp;amp;amp;quot;Wait&amp;amp;amp;amp;quot;

3樓2015-11-18 01:28:16

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51mimi

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我也做噬菌體展示，但是你們的問(wèn)題我怎么看不明白呢？是不是大家方法不同。

發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶端

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4樓2015-11-18 09:10:18

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普通表情龍兔虎貓

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