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zhousf0114銅蟲 (初入文壇)
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[求助]
基因表達(dá)問題
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各位蟲友好： 我想問一下，我的基因終止密碼后面無意的又加入了一個(gè)終止密碼子，然后后面是完整的3‘UTR序列，這樣的話會(huì)對(duì)表達(dá)效率造成影響嗎？因?yàn)槲疫x用的是自主型表達(dá)的啟動(dòng)子。 |
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zhousf0114
銅蟲 (初入文壇)
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9樓2013-06-26 15:28:40
Fleaves
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2樓2013-06-25 09:25:04
xl0071334
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3樓2013-06-25 10:48:32
zhousf0114
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你好，不好意思現(xiàn)在才回復(fù)你。這個(gè)3‘utr我指的是和5’utr相應(yīng)的。具體來說，我的基因是想在bla啟動(dòng)子下啟動(dòng)表達(dá)的，所以我把某個(gè)質(zhì)粒上的氨芐青霉素基因給替換成我所要表達(dá)的基因，然后把整個(gè)包括氨芐抗性標(biāo)記前面的啟動(dòng)子加上5‘utr序列和后面的包括終止子序列的3’utr序列，還有我所要表達(dá)的基因一并用重疊pcr連接起來，把它連接到我所需的表達(dá)載體上進(jìn)行表達(dá)的。但是設(shè)計(jì)引物的時(shí)候粗心大意在目的基因終止密碼后面引入了另外一個(gè)種子密碼子。所以不知道影不影響翻譯效率什么的 |
4樓2013-06-25 19:04:50
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