| 10 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 1376 | 回復(fù): 9 | ||||
dingxinag木蟲 (小有名氣)
|
[求助]
蛋白質(zhì)濃度檢測
|
|||
| 最近在做一個蛋白質(zhì)和細(xì)胞相互作用的實(shí)驗(yàn),但是沒法檢測作用如何,想來想去只能通過測定PBS中剩余蛋白質(zhì)的量來確定蛋白質(zhì)的消耗量。但是有一個問題,本人非生物的,不知道什么方法精確,在論壇里搜了一下,各種方法都有人用,也看不太懂,有沒有哪位高手能幫一下啊,我用的蛋白質(zhì)濃度是 50 ug/ml in PBS,用什么方法能精確測出剩余的蛋白質(zhì)濃度呢? 謝謝謝謝 |
新蟲 (小有名氣)
|
http://www.beyotime.com/bca.htm 應(yīng)該是沒問題的~~ QQ截圖20130627153047.png |

專家顧問 (知名作家)
![]() |
專家經(jīng)驗(yàn): +218 |
|
測定一下蛋白質(zhì)的濃度不就行了。比如:Bradford法 http://zhidao.baidu.com/question/322367292.html 考馬斯亮藍(lán)法(Bradford法)測定蛋白質(zhì)濃度1、試劑:(1)考馬斯亮藍(lán)試劑:考馬斯亮藍(lán)G—250 100mg溶于50ml 95%乙醇,加入100ml 85% H3PO4,用蒸餾水稀釋至1000ml, 濾紙過濾。最終試劑中含0.01%(W/V)考馬斯亮藍(lán)G—250, 4.7%(W/V)乙醇,8.5%(W/V)H3PO4。(2)標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)溶液:純的牛血清血蛋白,根據(jù)其純度同0.15mol/L NaCl配制成100 ug/ml蛋白溶液。2. 器材: (1)可見光分光光度計 (2)旋渦混合器 3、標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作 試管編號 0 1 2 3 4 5 6100ug/ml標(biāo)準(zhǔn)蛋白(ml) 0.0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.60.15mol/L NaCl (ml) 1 0.9 0.8 0.7 0.6 0.5 0.4考馬斯亮藍(lán)試劑 (ml) 5 5 5 5 5 5 5搖勻,1h內(nèi)以0號管為空白對照,在595nm處比色 以A595nm為縱坐標(biāo),標(biāo)準(zhǔn)蛋白含量為橫坐標(biāo)(六個點(diǎn)為10ug、20 ug、30 ug、40 ug、50 ug、60 ug),在坐標(biāo)軸上繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。4、樣品中蛋白質(zhì)含量的測定 另取兩支干凈的試管(做一重復(fù)),加入合適濃度的待測樣品,使其測定值在標(biāo)準(zhǔn)曲線的范圍內(nèi),測定方法同上,由樣品液的吸光度查標(biāo)準(zhǔn)曲線即可求出含量。注意事項(xiàng):1、 如果要求嚴(yán)格,最好在試劑加入后的5~20min內(nèi)測定光 吸收,因?yàn)檫@段時間內(nèi)顏色是最穩(wěn)定的。2、 若選擇在旋渦混合器上混合,注意不要太劇烈,以免產(chǎn)生大量氣泡而難于消除。 |
新蟲 (小有名氣)

木蟲 (小有名氣)
木蟲 (職業(yè)作家)

專家顧問 (知名作家)
![]() |
專家經(jīng)驗(yàn): +218 |
專家顧問 (知名作家)
![]() |
專家經(jīng)驗(yàn): +218 |
|
http://blog.163.com/mzy_l/blog/static/2824467520071014150280/ 我引用的網(wǎng)上材料,我都是至少大致看過,認(rèn)為至少沒有明顯錯誤和可操作才貼上來的! |
木蟲 (小有名氣)
榮譽(yù)版主 (知名作家)
海納百川

| 10 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 一志愿吉林大學(xué)材料學(xué)碩321求調(diào)劑 +9 | Ymlll 2026-03-18 | 12/600 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 一志愿武漢理工材料工程專碩調(diào)劑 +5 | Doleres 2026-03-19 | 5/250 |
|
|
[考博] 申博26年 +3 | 八6八68 2026-03-19 | 3/150 |
|
|
[考研] 一志愿天津大學(xué)化學(xué)工藝專業(yè)(081702)315分求調(diào)劑 +11 | yangfz 2026-03-17 | 11/550 |
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +3 | Mqqqqqq 2026-03-19 | 3/150 |
|
|
[考研] 332求調(diào)劑 +3 | ydfyh 2026-03-17 | 3/150 |
|
|
[考研] 085600材料與化工 +5 | 安全上岸! 2026-03-16 | 5/250 |
|
|
[考研] 311求調(diào)劑 +6 | 26研0 2026-03-15 | 6/300 |
|
|
[考研] 299求調(diào)劑 +5 | △小透明* 2026-03-17 | 5/250 |
|
|
[考研] 268求調(diào)劑 +8 | 一定有學(xué)上- 2026-03-14 | 9/450 |
|
|
[考研] 278求調(diào)劑 +3 | Yy7400 2026-03-13 | 3/150 |
|
|
[考研]
|
zhouzhen654 2026-03-16 | 3/150 |
|
|
[考研] [導(dǎo)師推薦]西南科技大學(xué)國防/材料導(dǎo)師推薦 +3 | 尖角小荷 2026-03-16 | 6/300 |
|
|
[考研] 中科院材料273求調(diào)劑 +4 | yzydy 2026-03-15 | 4/200 |
|
|
[考研] 326求調(diào)劑 +3 | mlpqaz03 2026-03-15 | 3/150 |
|
|
[考研] 085601材料工程315分求調(diào)劑 +3 | yang_0104 2026-03-15 | 3/150 |
|
|
[考研] 中科大材料專碩319求調(diào)劑 +3 | 孟鑫材料 2026-03-13 | 3/150 |
|
|
[考研] 266求調(diào)劑 +4 | 學(xué)員97LZgn 2026-03-13 | 4/200 |
|
|
[考研] 070303一志愿西北大學(xué)學(xué)碩310找調(diào)劑 +3 | d如愿上岸 2026-03-13 | 3/150 |
|
|
[考研] 290求調(diào)劑 +3 | ADT 2026-03-13 | 3/150 |
|