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蛋白質等電點沉淀之后怎么重新溶解
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現(xiàn)在在做蛋白質純化,想過陽離子交換柱,因為蛋白質穩(wěn)定pH要>4.5,等電點預測在5.1左右,故選用pH4.6的乙酸-乙酸鈉緩沖液,但加了之后就渾濁了,大俠們,我該怎么辦 |
木蟲 (正式寫手)
| 是否精確測算過蛋白等電點?因為你的蛋白穩(wěn)定要>4.5,用4.6的緩沖液去置換,蛋白會先經(jīng)過5.1的等電點沉淀,然后繼續(xù)加會稍許變清,但是因為距離等電點較近,所以不會變的很清,就是說不一定會完全溶解。樓主需要考慮一下精確測量蛋白的等電點,然后選擇合適的pH緩沖液。另外,層析類型也需要考慮,是否一定要用陽離子交換? |

木蟲 (著名寫手)
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