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舟之帆木蟲 (小有名氣)
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[求助]
PCR結(jié)果分析
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各位大俠求救啊： 我最近一直在做PCR，前天提的CDNA（總RNA純度為1.4多），昨天PCR，結(jié)果跑出了單一條帶（即我的目的基因），可是今天又提了CDNA（總RNA純度為1.5多），步驟方法都一樣，今天順便PCR，結(jié)果發(fā)現(xiàn)P出了好多雜帶，這是為什么�。� PCR結(jié)果有好多雜帶，如果按這個條件可以做實時熒光定量PCR不？ 小女子不勝感激------- |
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武穆大成
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舟之帆2樓2013-07-04 21:45:37
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我改了一下退火溫度，結(jié)果是好點了，可是還是有點拖尾，怎么回事，怎么辦？辛苦了，麻煩了.... |
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2013-07-08 14:20:16, 497 K
7樓2013-07-08 14:20:47
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舟之帆: 金幣+2, ★★★很有幫助 2013-09-04 19:13:25
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這位童鞋。。我猜，你給我看的應(yīng)該是反轉(zhuǎn)錄后pcr的結(jié)果，我個人覺著這個結(jié)果還是挺好的。但還是有點拖尾。。拖尾的原因有可能是因為模板濃度有點大，可以做個梯度稀釋下再跑pcr看看。。還有就是有可能是非特異擴增，這個是不是得做個熒光定量看下。看下溶解曲線怎么樣，。。祝好 |
8樓2013-07-08 15:06:23
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