 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 2561 | 回復(fù): 5 | |||
| 當(dāng)前只顯示滿(mǎn)足指定條件的回帖，點(diǎn)擊這里查看本話(huà)題的所有回帖 | |||
AlbaRosea金蟲(chóng) (初入文壇)
|
[求助]
PCAMBIA1300系列載體表達(dá)初始ATG
|
||
|
各位大俠、 請(qǐng)問(wèn)一下就是pCAMBIA1301,1304等幾個(gè)載體里邊。順時(shí)針的35s啟動(dòng)子下游，是從哪里的ATG開(kāi)始讀的呀？如果用ncoI 和bgl II 是不是都是從NCO I 的ATG開(kāi)始讀的呀？那么如果用這兩個(gè)酶切位點(diǎn)，是不是都要在目標(biāo)序列里補(bǔ)上兩個(gè)堿基啊才能保證不會(huì)移碼��？（ 1 catggtagat ctgactagta aaggagaaga，摘自http://www.ncbi.nlm.nih.gov/nuccore/AF234298） 生物基礎(chǔ)薄弱啊。忘高人指點(diǎn)一下啊。謝謝。 |
回復(fù)此樓» 收錄本帖的淘帖專(zhuān)輯推薦
 生物科學(xué)系列 |
» 猜你喜歡
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：實(shí)驗(yàn)器材的 “烏龍”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：和實(shí)驗(yàn)材料的 “斗智斗勇”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤(rùn)色/翻譯怎么收費(fèi)?
已經(jīng)有277人回復(fù)
-
蛋白質(zhì)檢測(cè)：精準(zhǔn)分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之小鼠實(shí)驗(yàn)：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計(jì)，解析生命機(jī)制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之重金屬檢測(cè)：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線(xiàn)
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“蛙測(cè)重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專(zhuān)業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
» 本主題相關(guān)價(jià)值貼推薦，對(duì)您同樣有幫助:
- pAN7-1質(zhì)粒分析
已經(jīng)有18人回復(fù)
- 卡那霉素的基因序列是什么
已經(jīng)有3人回復(fù)
- 質(zhì)粒pCAMBIA1300轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌EHA105中的問(wèn)題？
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 【其他】載體交換！
已經(jīng)有12人回復(fù)
AlbaRosea
金蟲(chóng) (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 613.8
- 帖子: 25
- 在線(xiàn): 41.3小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 1329619
- 注冊(cè): 2011-06-23
- 性別: MM
- 專(zhuān)業(yè): 觀(guān)賞園藝學(xué)
5樓2013-07-13 08:55:30
cicelyzh
鐵桿木蟲(chóng) (職業(yè)作家)
- MolEPI: 10
- 應(yīng)助: 1662 (講師)
- 金幣: 8693.8
- 紅花: 72
- 帖子: 3516
- 在線(xiàn): 456小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 1614001
- 注冊(cè): 2012-02-13
- 專(zhuān)業(yè): 生物化學(xué)
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
AlbaRosea: 金幣+10, ★★★很有幫助, 有幫助。謝謝 2013-07-11 16:28:39
myprayer: 金幣+2, 回答很好，perfect 2013-07-12 08:35:13
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
AlbaRosea: 金幣+10, ★★★很有幫助, 有幫助。謝謝 2013-07-11 16:28:39
myprayer: 金幣+2, 回答很好，perfect 2013-07-12 08:35:13
| 是的。如果你的基因開(kāi)始是序列是ATGG，克隆設(shè)計(jì)5'引物的時(shí)候可以直接利用NcoI酶切位點(diǎn)的序列，從第五個(gè)堿基開(kāi)始克隆。如果基因的第四個(gè)堿基不是G，你需要在基因序列前面補(bǔ)充兩個(gè)堿基。 |
2樓2013-07-11 07:52:20
AlbaRosea
金蟲(chóng) (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 613.8
- 帖子: 25
- 在線(xiàn): 41.3小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 1329619
- 注冊(cè): 2011-06-23
- 性別: MM
- 專(zhuān)業(yè): 觀(guān)賞園藝學(xué)
3樓2013-07-12 20:10:35
cicelyzh
鐵桿木蟲(chóng) (職業(yè)作家)
- MolEPI: 10
- 應(yīng)助: 1662 (講師)
- 金幣: 8693.8
- 紅花: 72
- 帖子: 3516
- 在線(xiàn): 456小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 1614001
- 注冊(cè): 2012-02-13
- 專(zhuān)業(yè): 生物化學(xué)
|
如果是融合蛋白，如果你的目的基因在GFP或者GUS前面（比方說(shuō)你用NcoI, BglII, SpeI），你需要去掉目的基因的終止密碼子并核對(duì)從你克隆位點(diǎn)后面的序列到融合基因的ATG之間的堿基數(shù)目是3的倍數(shù)，如果不是需要在克隆基因時(shí)的3'引物處補(bǔ)堿基。如果你把目的基因連在報(bào)告基因后面，你需要保證的是去掉報(bào)告基因終止密碼子，并且從此處到目的基因的ATG之間的堿基數(shù)目是3的倍數(shù)而不移碼。如果做融合蛋白，為了保證折疊的獨(dú)立和穩(wěn)定，往往可以在兩個(gè)蛋白之間加linker。 |
4樓2013-07-12 23:05:48
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 0854可跨調(diào)劑，一作一項(xiàng)核心論文五項(xiàng)專(zhuān)利，省、國(guó)級(jí)證書(shū)40+數(shù)一英一287 +5 | 小李0854 2026-03-16 | 5/250 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 331求調(diào)劑（0703有機(jī)化學(xué) +6 | ZY-05 2026-03-13 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 281求調(diào)劑（0805） +4 | 煙汐憶海 2026-03-16 | 11/550 |
|
|
|
[考研] 303求調(diào)劑 +4 | 睿08 2026-03-17 | 6/300 |
|
|
[考研] 生物學(xué)071000 329分求調(diào)劑 +3 | 我愛(ài)生物生物愛(ài)?/a> 2026-03-17 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 材料與化工求調(diào)劑 +6 | 為學(xué)666 2026-03-16 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 289求調(diào)劑 +6 | 步川酷紫123 2026-03-11 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 274求調(diào)劑 +5 | 時(shí)間點(diǎn) 2026-03-13 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 304求調(diào)劑 +5 | 素年祭語(yǔ) 2026-03-15 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 一志愿211 0703方向310分求調(diào)劑 +3 | 努力奮斗112 2026-03-15 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 070300化學(xué)學(xué)碩求調(diào)劑 +6 | 太想進(jìn)步了0608 2026-03-16 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 0703化學(xué)調(diào)劑，求各位老師收留 +8 | 秋有木北 2026-03-14 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 070303 總分349求調(diào)劑 +3 | LJY9966 2026-03-15 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 材料與化工一志愿南昌大學(xué)327求調(diào)劑推薦 +7 | Ncdx123456 2026-03-13 | 8/400 |
|
|
|
[基金申請(qǐng)] 現(xiàn)在如何回避去年的某一個(gè)專(zhuān)家，不知道名字 +3 | zk200107 2026-03-12 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 學(xué)碩285求調(diào)劑 +13 | Wisjxn 2026-03-12 | 46/2300 |
|
|
|
[考研] 333求調(diào)劑 +3 | 球球古力 2026-03-11 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 085600材料與化工 309分請(qǐng)求調(diào)劑 +7 | dtdxzxx 2026-03-12 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 0817化學(xué)工程與技術(shù)考研312分調(diào)劑 +3 | T123 tt 2026-03-12 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 270求調(diào)劑 085600材料與化工專(zhuān)碩 +3 | YXCT 2026-03-11 | 3/150 |
|