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北京石油化工學(xué)院2026年研究生招生接收調(diào)劑公告

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殷筱婕

新蟲(chóng) (初入文壇)

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[求助] PCR結(jié)果為目的條帶，可是測(cè)序同源比對(duì)很差，這是為什么呀？求助�。�！

我拿山羊NCBI上登錄的序列來(lái)設(shè)計(jì)引物，PCR后連接載體，菌液測(cè)序，結(jié)果再與原序列比對(duì)，同源性很差，表現(xiàn)為斷斷續(xù)續(xù)的。懷疑測(cè)的是載體的那一段，于是又直接測(cè)PCR產(chǎn)物，結(jié)果一樣。為什么擴(kuò)出來(lái)的片段沒(méi)問(wèn)題，測(cè)序是這種結(jié)果？請(qǐng)問(wèn)是什么原因呢？有沒(méi)什么可以解決的辦法呢？謝謝，請(qǐng)各位大神幫幫忙�。�！

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1樓 2013-07-19 21:54:57

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liyongliangx

銅蟲(chóng) (小有名氣)

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殷筱婕(myprayer代發(fā)): 金幣+1, 贈(zèng)人玫瑰手有余香，分子生物期待你的更多精彩。 2013-07-20 10:45:25

你換個(gè)測(cè)序公司試試看呢，如果還是這樣，那就可能是你擴(kuò)增的不對(duì)或者序列本身就不對(duì)

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3樓2013-07-19 22:13:46

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yesali

木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)

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【答案】應(yīng)助回帖

感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1

比對(duì)一下氨基酸看看

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2樓2013-07-19 22:13:34

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雅娣

新蟲(chóng) (初入文壇)

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【答案】應(yīng)助回帖

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kx444555: 金幣+2, 鼓勵(lì)交流 2013-07-31 22:42:03

我遇到過(guò)這樣的情況，PCR條帶很亮說(shuō)明某個(gè)長(zhǎng)度的DNA被擴(kuò)出來(lái)了，但是比對(duì)的結(jié)果不好就說(shuō)明提出來(lái)的DNA不是目的DNA，是其他東西。。也有可能是引物的問(wèn)題，擴(kuò)出來(lái)的不是目的基因。。

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4樓2013-07-31 22:30:47

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zxf427427

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把引物拿去ncbi blast 看是否和其他片段也能結(jié)合剛好擴(kuò)出來(lái)同樣大小片段

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5樓2013-09-29 09:51:13

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