| 3 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 487 | 回復: 2 | |||
[求助]
測細胞凋亡 增值~求助 沒做過
|
| 實驗用不同的飼料喂實驗體,最后要測腸道上皮細胞的凋亡和增值,兩個月的投喂,就直接最后取樣試劑盒就能搞定增值,細胞儀測凋亡么 ?來個思路啊 求助~ |

|
這是可以的啊,你只要看凋亡和增殖嗎?我用過一個試劑盒細胞周期與凋亡檢測試劑盒(Cell Cycle and Apoptosis Analysis Kit),步驟如下: 1. 自備試劑: PBS;70%乙醇 2. 細胞樣品準備: a、 貼壁細胞:吸棄細胞培養(yǎng)液,胰酶消化吹打細胞,制備單細胞懸液,1000g離心5分鐘沉淀細胞后,用1ml預冷的PBS重懸。然后再一次1000g離心5分鐘沉淀細胞。 b、 懸浮細胞:1000g離心5分鐘沉淀細胞后,用1ml預冷的PBS重懸。然后再一次1000g離心5分鐘沉淀細胞。 c、 組織細胞:將組織塊用剪刀剪成盡量小的小塊后,用0.25%的胰酶消化0.5-1個小時。經(jīng)過200-400目篩網(wǎng)過濾得到單細胞懸液。1000g離心5分鐘沉淀細胞后,用1ml預冷的PBS重懸。然后再一次1000g離心5分鐘沉淀細胞。 3. 細胞固定: 細胞沉淀用1ml預冷的70%乙醇輕輕混勻,4℃固定2個小時以上或者過夜。接下來1000g離心5分鐘沉淀細胞后,用1ml預冷的PBS重懸。然后再次1000g離心5分鐘沉淀細胞。 4. 染色: 碘化丙啶染色液配置:0.5 ml染色緩沖液中加入10 ul碘化丙啶儲液和10ul RNase A,混勻待用。每個細胞樣品加入0.5ml配置好的碘化丙啶染色液,輕輕混勻重懸細胞。37℃,避光溫浴30分鐘后,即可上流式細胞儀檢測(5小時內(nèi)完成為佳)。激發(fā)波長為488nm,檢測紅色熒光。 注意事項: 1. 操作碘化丙啶時,應注意防護,保護眼睛、避免吸入、并戴一次性手套。 2. 碘化丙啶存在淬滅現(xiàn)象,保存和使用過程中注意避光。 |
| 3 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 268求調(diào)劑 +8 | 簡單點0 2026-03-17 | 8/400 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 265求調(diào)劑 +12 | 梁梁校校 2026-03-19 | 14/700 |
|
|
[考研] 346求調(diào)劑[0856] +4 | WayneLim327 2026-03-16 | 7/350 |
|
|
[考研] 機械專碩299求調(diào)劑至材料 +3 | kkcoco25 2026-03-16 | 4/200 |
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +3 | Ma_xt 2026-03-17 | 3/150 |
|
|
[考研] 一志愿華南師大 070300(化學)304分求調(diào)劑 +3 | 0703武芊慧雪304 2026-03-18 | 3/150 |
|
|
[考研] 085600材料與化工 +8 | 安全上岸! 2026-03-16 | 8/400 |
|
|
[考研] 一志愿西南交通 專碩 材料355 本科雙非 求調(diào)劑 +5 | 西南交通專材355 2026-03-19 | 5/250 |
|
|
[考研]
|
簡木ChuFront 2026-03-19 | 8/400 |
|
|
[考研] 0817 化學工程 299分求調(diào)劑 有科研經(jīng)歷 有二區(qū)文章 +22 | rare12345 2026-03-18 | 22/1100 |
|
|
[考研] 一志愿華中農(nóng)業(yè)071010,總分320求調(diào)劑 +3 | 困困困困坤坤 2026-03-20 | 3/150 |
|
|
[考研] 0703化學調(diào)劑 ,六級已過,有科研經(jīng)歷 +13 | 曦熙兮 2026-03-15 | 13/650 |
|
|
[考研] 0856調(diào)劑,是學校就去 +8 | sllhht 2026-03-19 | 9/450 |
|
|
[考研] 材料考研調(diào)劑 +3 | xwt。 2026-03-19 | 3/150 |
|
|
[考研] 化學工程321分求調(diào)劑 +15 | 大米飯! 2026-03-15 | 18/900 |
|
|
[考研] 收復試調(diào)劑生 +4 | 雨后秋荷 2026-03-18 | 4/200 |
|
|
[考研] 材料,紡織,生物(0856、0710),化學招生啦 +3 | Eember. 2026-03-17 | 9/450 |
|
|
[考研] 308求調(diào)劑 +4 | 是Lupa啊 2026-03-16 | 4/200 |
|
|
[考研] 有沒有道鐵/土木的想調(diào)劑南林,給自己招師弟中~ +3 | TqlXswl 2026-03-16 | 7/350 |
|
|
[考研] 0703化學調(diào)劑 290分有科研經(jīng)歷,論文在投 +7 | 膩膩gk 2026-03-14 | 7/350 |
|