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JT_Y1990

鐵桿木蟲(chóng) (小有名氣)

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[求助] 藍(lán)白斑篩選過(guò)程中的假陽(yáng)性問(wèn)題

在進(jìn)行T-A克隆后的藍(lán)白斑篩選過(guò)程中，平板上長(zhǎng)出許多藍(lán)斑和白斑，但是檢測(cè)的白斑都是假陽(yáng)性的，沒(méi)有出現(xiàn)正確的，這是什么原因造成的？為什么會(huì)有假陽(yáng)性以及假陽(yáng)性形成的原理？

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1樓 2013-07-30 18:28:56

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liwhite

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http://www.gaoyang168.com/html/201211/5152923.html 看看有沒(méi)有用

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2樓2013-07-31 07:38:19

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acetylcholin

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應(yīng)該是連接過(guò)程出現(xiàn)問(wèn)題，可能沒(méi)連接上，如果連接上了，挑十個(gè)斑不會(huì)一個(gè)陽(yáng)性都沒(méi)有，那點(diǎn)也太背了。
另外，可能是挑斑后的PCR檢測(cè)出問(wèn)題，換個(gè)體系重新做兩遍應(yīng)該可以。

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3樓2013-07-31 15:41:49

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JT_Y1990

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2樓: Originally posted by liwhite at 2013-07-31 07:38:19
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4樓2013-08-04 00:04:11

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引用回帖:

3樓: Originally posted by acetylcholin at 2013-07-31 15:41:49
應(yīng)該是連接過(guò)程出現(xiàn)問(wèn)題，可能沒(méi)連接上，如果連接上了，挑十個(gè)斑不會(huì)一個(gè)陽(yáng)性都沒(méi)有，那點(diǎn)也太背了。
另外，可能是挑斑后的PCR檢測(cè)出問(wèn)題，換個(gè)體系重新做兩遍應(yīng)該可以。

我做的正對(duì)照有目的基因帶，負(fù)對(duì)照沒(méi)有出現(xiàn)，按說(shuō)體系沒(méi)有錯(cuò)誤的，程序改過(guò)幾次，但是也沒(méi)有擴(kuò)出目的帶。

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5樓2013-08-04 00:06:48

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wwlygy

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我P很多基因都沒(méi)有用藍(lán)白篩選，直接做就行了，現(xiàn)在我是PCR小能手，啦啦，有需要聯(lián)系我哦！

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6樓2013-08-07 08:01:23

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