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[求助]
考馬斯亮藍法測蛋白質
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| 今天做了標準曲線,空白值得吸光度偏高,達到1.356,100mg/L的,加乙醇和酒精配的,配考馬斯亮藍的時候感覺顏色就比較深,是深藍色,正常嗎?線性一般,兩個9,我就是覺得吸光度太高了,去掉空白的吸光度正常,怎么回事呢, |
我的地盤你做主 |
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具體過程是這樣做的,我寫出來吧,方便大家給我找毛病,是用分光光度計在595nm處測得,用的石英比色皿 取100mg考馬斯亮藍G-250溶于50mL 95%乙醇,加入100mL 85%磷酸,我看我的磷酸是優(yōu)級純,沒寫百分含量,應該是100%吧,所以我加了85mL,定容到1L 顏色比較深,所以空白高, 取0.01G牛血清蛋白,溶解后定容到100mL 標曲加入0,0.2,0.4,0.6,0.8,1mL標準溶液,補充水位1mL,加入考馬斯亮藍5mL,混合,放置5MIN,在595NM測吸光度,我的吸光值分別為1.356,1.446,1.502,1.613,1.728,1.743 我是不是應該少加些考馬斯亮藍了,多加些標準溶液?各位大俠指導下撒 |
木蟲 (小有名氣)

木蟲 (小有名氣)

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