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考馬斯亮藍(lán)法測(cè)蛋白質(zhì)
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| 今天做了標(biāo)準(zhǔn)曲線，空白值得吸光度偏高，達(dá)到1.356，100mg/L的，加乙醇和酒精配的，配考馬斯亮藍(lán)的時(shí)候感覺顏色就比較深，是深藍(lán)色，正常嗎？線性一般，兩個(gè)9，我就是覺得吸光度太高了，去掉空白的吸光度正常，怎么回事呢， |
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lovezxl3606
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5樓2013-08-16 08:55:11
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具體過程是這樣做的，我寫出來(lái)吧，方便大家給我找毛病，是用分光光度計(jì)在595nm處測(cè)得，用的石英比色皿 取100mg考馬斯亮藍(lán)G-250溶于50mL 95%乙醇，加入100mL 85%磷酸，我看我的磷酸是優(yōu)級(jí)純，沒寫百分含量，應(yīng)該是100%吧，所以我加了85mL，定容到1L 顏色比較深，所以空白高， 取0.01G牛血清蛋白，溶解后定容到100mL 標(biāo)曲加入0,0.2,0.4,0.6,0.8,1mL標(biāo)準(zhǔn)溶液，補(bǔ)充水位1mL，加入考馬斯亮藍(lán)5mL，混合，放置5MIN，在595NM測(cè)吸光度，我的吸光值分別為1.356,1.446,1.502,1.613,1.728,1.743 我是不是應(yīng)該少加些考馬斯亮藍(lán)了，多加些標(biāo)準(zhǔn)溶液？各位大俠指導(dǎo)下撒 |
2樓2013-08-15 12:02:04
lovezxl3606
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3樓2013-08-15 14:42:58
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