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lyz65956木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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[交流]
TA克隆關(guān)于藍(lán)白斑篩選 已有1人參與
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大家好，第一次做TA克隆，想問(wèn)一下，在板子上長(zhǎng)出的單個(gè)白斑就是克隆嗎？是直接挑取培養(yǎng)后驗(yàn)證就可以嗎？是否需要?jiǎng)澗�分離單克隆再驗(yàn)證？ 想要保存菌種的話直接用液體LB加甘油就可以嗎？如果不加甘油可以 在4度放多久？ |
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qingtianli
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小木蟲(chóng): 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
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挑白菌肯定是對(duì)的，不過(guò)板子也不要輕易丟掉，我們遇到過(guò)極品的事情，挑的白菌抽不到質(zhì)粒，無(wú)奈之下，挑了幾個(gè)藍(lán)菌反倒測(cè)序成功了，有解釋說(shuō)白菌是污染菌，藍(lán)菌是因?yàn)椴迦肫螞](méi)有破壞酶的活性。 TA克隆效率比較高，如果覺(jué)得培養(yǎng)驗(yàn)證麻煩的話，可以先用菌落PCR驗(yàn)證。劃線分離單菌當(dāng)然更好了，不過(guò)通過(guò)測(cè)序了一般就沒(méi)問(wèn)題。 保存菌種LB加甘油-80度就可以。 4度1-2周一般沒(méi)問(wèn)題的。如果嫌低溫冰箱不方便，有時(shí)候加點(diǎn)甘油在-20度凍一管，或者劃個(gè)平板，4度下?lián)蔚臅r(shí)間感覺(jué)比液體LB長(zhǎng)些。 |
lyz659562樓2013-08-17 03:46:06
lyz65956
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3樓2013-08-17 13:52:41
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