 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 查看: 7296 | 回復(fù): 22 | |||||||
freezymind新蟲(chóng) (初入文壇)
|
[求助]
關(guān)于EDC/NHS 請(qǐng)教各位大牛
|
||||||
|
最近在做Fe3O4-Au納米粒子連赫賽汀（一種單克隆抗體藥物）的實(shí)驗(yàn)，試了挺多遍都沒(méi)有理想的結(jié)果，各位大牛幫忙看看哪里出問(wèn)題了： 我的具體步驟： 1、5mg連有PEG-COOH納米粒子溶于5ml水中， 2、加入固體EDC.HCL 220mg(文獻(xiàn)上看來(lái)的，50、100mg也都試過(guò)） sulfo-NHS 200mg(EDC.HCL/sulfo-NHS 1:1 5:1 10:1也都試過(guò)），調(diào)節(jié)PH至5.0左右，室溫卵育15min(30min 1h 2h都試過(guò)）， 3、硼砂緩沖液調(diào)節(jié)至7.0（亦曾試過(guò)用超濾管去除EDC NHS后調(diào)節(jié)PH）加入赫賽汀室溫2h（室溫過(guò)夜、4°2h過(guò)夜都試過(guò)）。 離心后沒(méi)什么沉淀出來(lái)啊，文獻(xiàn)上說(shuō)會(huì)有沉淀出現(xiàn)的。請(qǐng)大牛們幫我看看哪里出問(wèn)題了，感激不盡 |
回復(fù)此樓» 收錄本帖的淘帖專輯推薦
 羧基活化EDC|DCC,NHS | EDC/NHS活化羧基 | 醫(yī)學(xué)用書(shū) | TOMA'S INDEX |
| 花未眠 |
» 猜你喜歡
求調(diào)劑推薦
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué)生物與醫(yī)藥招收調(diào)劑生�。。。。。。。。。�
已經(jīng)有14人回復(fù)
-
生物物理、生物化學(xué)與分子生物學(xué)論文潤(rùn)色/翻譯怎么收費(fèi)?
已經(jīng)有96人回復(fù)
-
總分343，求生物學(xué)調(diào)劑
已經(jīng)有2人回復(fù)
-
生物與醫(yī)藥專碩，一志愿山東大學(xué)，初試成績(jī)338，求調(diào)劑
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
考研292求調(diào)劑
已經(jīng)有7人回復(fù)
-
安徽大學(xué)專碩生物與醫(yī)藥專業(yè)(086000)324分，英語(yǔ)已過(guò)四六級(jí)，六級(jí)521，求調(diào)劑
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
生物學(xué)308分求調(diào)劑（一志愿華東師大）
已經(jīng)有1人回復(fù)
-
大連醫(yī)科大學(xué)腫瘤干細(xì)胞研究院 招收生物化學(xué)與分子生物學(xué)專業(yè)碩士研究生
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
招考研調(diào)劑生
已經(jīng)有0人回復(fù)
» 本主題相關(guān)商家推薦: (我也要在這里推廣)
» 本主題相關(guān)價(jià)值貼推薦，對(duì)您同樣有幫助:
- EDC-NHS活化羧基進(jìn)行酰胺反應(yīng)
已經(jīng)有15人回復(fù)
- EDC/NHS活化金電極-硫醇后抗體固定不上
已經(jīng)有24人回復(fù)
- 請(qǐng)教EDC/NHS做酯化反應(yīng)的問(wèn)題，做過(guò)的朋友幫幫忙
已經(jīng)有20人回復(fù)
- 關(guān)于EDC和NHS 活化的-cooH能不能和氨基鹽酸鹽反應(yīng)？
已經(jīng)有19人回復(fù)
- EDC NHS的問(wèn)題
已經(jīng)有14人回復(fù)
- 關(guān)于EDC/NHS ，羥基和羧基的問(wèn)題
已經(jīng)有11人回復(fù)
- 請(qǐng)教各位一個(gè)關(guān)于EDC/NHS偶聯(lián)的問(wèn)題
已經(jīng)有23人回復(fù)
- 求助EDC和NHS偶聯(lián)蛋白的原理，完整版的
已經(jīng)有6人回復(fù)
- 多糖酰胺化改性過(guò)程中EDC和NHS的配比問(wèn)題
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 谷胱甘肽修飾的CdTe EDC NHS法連抗體連不上
已經(jīng)有12人回復(fù)
- 【求助】關(guān)于NHS、EDC的問(wèn)題
已經(jīng)有11人回復(fù)
- 【求助】EDC和NHS的混合液需要現(xiàn)配現(xiàn)用嗎？
已經(jīng)有10人回復(fù)
- 【求助】羧基的激活劑NHS或EDC
已經(jīng)有24人回復(fù)
- 【請(qǐng)教】請(qǐng)教關(guān)于EDC和NHS？
已經(jīng)有18人回復(fù)
sunshaokai
金蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
- 應(yīng)助: 4 (幼兒園)
- 金幣: 994.9
- 散金: 27
- 紅花: 2
- 帖子: 557
- 在線: 203.5小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 733999
- 注冊(cè): 2009-03-28
- 專業(yè): 納米醫(yī)學(xué)
【答案】應(yīng)助回帖
★
markar: 金幣+1, 應(yīng)助指數(shù)+1, 感謝回帖交流！ 2013-08-20 22:43:45
markar: 金幣+1, 應(yīng)助指數(shù)+1, 感謝回帖交流！ 2013-08-20 22:43:45
|
1.Fe3O4-Au納米離子和PEG-COOH是怎么作用上去的？你用的是SH-PEG-COOH？總之，你要保證COOH是游離在外面的！ 2.你加多巴胺是做什么用呢，因?yàn)樗拇嬖冢隙〞?huì)消耗點(diǎn)一定量的COOH 2.關(guān)于離心沉淀的問(wèn)題，首先你的PEG-COOH納米粒子離心會(huì)沉淀嗎？如果它不沉淀，那么你接上蛋白，它基本也不會(huì)沉淀；如果你的PEG-COOH納米粒子離心沉淀，接上蛋白后，由于蛋白能增加其水溶性（就向蛋白本省你通過(guò)離心是離不下來(lái)的），也有可能不沉淀了。這反而說(shuō)明蛋白可能接上去了，你就得通過(guò)超濾的辦法進(jìn)行提純了。 3.關(guān)于NHS和EDC的用法用量，（1） Nano Lett. 2002, 2, 817–822. （2）Anal. Chem. 2010, 82, 1427-1433. 關(guān)于郵相轉(zhuǎn)水相（1）Adv. Mater. 2011, 23, 4886-4891. （2） Biomaterials. 2012, 33, 2215-2222. 其實(shí)你參照第一個(gè)文獻(xiàn)做法，直接包PVP就可以。 |
» 本帖已獲得的紅花（最新10朵）
freezymind11樓2013-08-20 16:30:05
piaofei123
鐵蟲(chóng) (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 4.4
- 帖子: 25
- 在線: 20.8小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 2511936
- 注冊(cè): 2013-06-18
- 性別: GG
- 專業(yè): 臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)
15樓2013-08-24 10:20:51
xingjiuwcc
木蟲(chóng) (著名寫(xiě)手)
新手上路
- 應(yīng)助: 17 (小學(xué)生)
- 金幣: 1880.3
- 散金: 450
- 紅花: 9
- 沙發(fā): 11
- 帖子: 2087
- 在線: 676小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 1281579
- 注冊(cè): 2011-04-29
- 性別: GG
- 專業(yè): 生物物理、生物化學(xué)與分子
2樓2013-08-17 00:08:04
zyy880326
至尊木蟲(chóng) (職業(yè)作家)
- 應(yīng)助: 36 (小學(xué)生)
- 金幣: 10598.5
- 散金: 1356
- 紅花: 9
- 帖子: 4380
- 在線: 507.8小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 1026297
- 注冊(cè): 2010-05-22
- 專業(yè): 生物醫(yī)用高分子材料
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
freezymind: 金幣+1, ★有幫助, 金幣較少，多多見(jiàn)諒哈 2013-08-17 12:14:34
freezymind: 金幣+4, ★★★很有幫助, 感謝達(dá)人 2013-08-17 21:22:47
紅舟流星: 金幣+1, 歡迎來(lái)生物材料板塊應(yīng)助交流 2013-08-17 22:33:10
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
freezymind: 金幣+1, ★有幫助, 金幣較少，多多見(jiàn)諒哈 2013-08-17 12:14:34
freezymind: 金幣+4, ★★★很有幫助, 感謝達(dá)人 2013-08-17 21:22:47
紅舟流星: 金幣+1, 歡迎來(lái)生物材料板塊應(yīng)助交流 2013-08-17 22:33:10
| 你看下這個(gè)貼：http://www.gaoyang168.com/bbs/viewthread.php?tid=5331024 我覺(jué)得你的步驟有問(wèn)題，一般不這樣做吧。還有你的EDC.HCL/sulfo-NHS都是EDC的量高，是不是該NHS的量多投些吧。我最近也在調(diào)研文獻(xiàn)，也要做這種反應(yīng)，希望多交流下吧。 |
3樓2013-08-17 09:36:42
freezymind
新蟲(chóng) (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 144.1
- 紅花: 1
- 帖子: 42
- 在線: 51.1小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 2595622
- 注冊(cè): 2013-08-13
- 性別: GG
- 專業(yè): 消化系統(tǒng)疾病診療新技術(shù)
4樓2013-08-17 12:27:19
sunshaokai
金蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
- 應(yīng)助: 4 (幼兒園)
- 金幣: 994.9
- 散金: 27
- 紅花: 2
- 帖子: 557
- 在線: 203.5小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 733999
- 注冊(cè): 2009-03-28
- 專業(yè): 納米醫(yī)學(xué)
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
紅舟流星: 金幣+1, 歡迎來(lái)生物材料板塊應(yīng)助交流 2013-08-17 22:33:21
freezymind: 金幣+5 2013-08-19 11:24:04
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
紅舟流星: 金幣+1, 歡迎來(lái)生物材料板塊應(yīng)助交流 2013-08-17 22:33:21
freezymind: 金幣+5 2013-08-19 11:24:04
|
1.你這EDC和NHS加的也太多了吧？我們一般都是幾十毫克材料加入幾毫克足以。 2.你可以試一下，將50 mg PEG-COOH納米粒子溶于PBS緩沖溶液中（7.0，中性或偏酸一點(diǎn)活性較好），加入10 mg EDC，10min后加入10 mg NHS（二者摩爾比為1：1即可，稍微多點(diǎn)少點(diǎn)影響不大），反應(yīng)1h后加入赫賽汀。反應(yīng)過(guò)夜。 |
5樓2013-08-17 15:00:03
freezymind
新蟲(chóng) (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 144.1
- 紅花: 1
- 帖子: 42
- 在線: 51.1小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 2595622
- 注冊(cè): 2013-08-13
- 性別: GG
- 專業(yè): 消化系統(tǒng)疾病診療新技術(shù)
6樓2013-08-17 16:19:55
sunshaokai
金蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
- 應(yīng)助: 4 (幼兒園)
- 金幣: 994.9
- 散金: 27
- 紅花: 2
- 帖子: 557
- 在線: 203.5小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 733999
- 注冊(cè): 2009-03-28
- 專業(yè): 納米醫(yī)學(xué)
★
markar: 金幣+1, 感謝回帖交流！ 2013-08-20 22:43:21
markar: 金幣+1, 感謝回帖交流！ 2013-08-20 22:43:21
|
你可以稍微參考下這個(gè)http://wenku.baidu.com/view/ab83173510661ed9ad51f3b4.html 你可以看到從反應(yīng)機(jī)理上看PEG-COOH：EDC：NHS=1：1：1就可以啦。 但是為了要保證轉(zhuǎn)化率，稍微多加一些，但也不至于加到幾百倍吧。 在你的試驗(yàn)中：5mg連有PEG-COOH納米粒子溶于5ml水中，加入固體EDC.HCL 220mg(文獻(xiàn)上看來(lái)的。PEG-COOH：EDC：NHS（摩爾比）應(yīng)該不止1：100：100吧。 我覺(jué)得你就用我上面給你回復(fù)的步驟試一下，應(yīng)該沒(méi)有問(wèn)題。  |
7樓2013-08-17 16:53:38
sunshaokai
金蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
- 應(yīng)助: 4 (幼兒園)
- 金幣: 994.9
- 散金: 27
- 紅花: 2
- 帖子: 557
- 在線: 203.5小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 733999
- 注冊(cè): 2009-03-28
- 專業(yè): 納米醫(yī)學(xué)
8樓2013-08-17 16:55:23
freezymind
新蟲(chóng) (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 144.1
- 紅花: 1
- 帖子: 42
- 在線: 51.1小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 2595622
- 注冊(cè): 2013-08-13
- 性別: GG
- 專業(yè): 消化系統(tǒng)疾病診療新技術(shù)
9樓2013-08-17 21:08:52
freezymind
新蟲(chóng) (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 144.1
- 紅花: 1
- 帖子: 42
- 在線: 51.1小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 2595622
- 注冊(cè): 2013-08-13
- 性別: GG
- 專業(yè): 消化系統(tǒng)疾病診療新技術(shù)
|
大神 你好： 我昨天按你說(shuō)的方法試了下：25mg連有PEG-COOH納米粒子溶于5ml水中，加入固體EDC.HCL 8mg，稍候加入8mg NHS, 今天早上仍然沒(méi)有離心下來(lái)沉淀。 我看蟲(chóng)友們討論說(shuō)DCC/NHS在郵箱也是-COOH的催化劑，我納米粒子溶于水時(shí)是2.5mg納米粒子+100ugDCC+100ug NHS+75ug 多巴胺，會(huì)不會(huì)是這個(gè)過(guò)程中把-COOH鍵消耗掉了？還有，你是怎么把油相納米粒子溶于水的？我是醫(yī)學(xué)專業(yè)的，很多不懂的地方，還請(qǐng)大神不吝賜教，感激不盡！ |
10樓2013-08-19 10:39:32
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 freezymind 的主題更新
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 材料與化工272求調(diào)劑 +9 | 阿斯蒂芬2004 2026-03-28 | 9/450 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 085602 化工專碩 338分 求調(diào)劑 +11 | 路癡小琪 2026-03-27 | 11/550 |
|
|
|
[考研] 材料求調(diào)劑 +9 | @taotao 2026-03-21 | 9/450 |
|
|
|
[材料工程] 一志愿C9材料與化工專業(yè)總分300求調(diào)劑 +8 | 曼111 2026-03-24 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 0703化學(xué)/290求調(diào)劑/本科經(jīng)歷豐富/工科也可 +9 | 丹青奶蓋 2026-03-26 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 086502化學(xué)工程342求調(diào)劑 +6 | 阿姨復(fù)古不過(guò) 2026-03-27 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 331環(huán)境科學(xué)與工程求調(diào)劑 +3 | 熠然好運(yùn)氣 2026-03-27 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 考研化學(xué)308分求調(diào)劑 +10 | 你好明天你好 2026-03-23 | 12/600 |
|
|
|
[考研] 0703化學(xué)一志愿南京師范大學(xué)303求調(diào)劑 +3 | zzffylgg 2026-03-24 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 359求調(diào)劑 +4 | 王了個(gè)楠 2026-03-25 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 343求調(diào)劑 +4 | 贈(zèng)我一本書(shū) 2026-03-23 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 材料考研求調(diào)劑 +3 | Dendel 2026-03-23 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 271求調(diào)劑 +6 | 生如夏花… 2026-03-22 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 一志愿南航 335分 | 0856材料化工 | GPA 4.07 | 有科研經(jīng)歷 +6 | cccchenso 2026-03-23 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 【2026考研調(diào)劑】制藥工程 284分 求相關(guān)專業(yè)調(diào)劑名額 +4 | 袁奐奐 2026-03-25 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 284求調(diào)劑 +15 | Zhao anqi 2026-03-22 | 15/750 |
|
|
|
[考研] 化工專碩求調(diào)劑 +3 | question挽風(fēng) 2026-03-24 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 277分求調(diào)劑，跨調(diào)材料 +3 | 考研調(diào)劑lxh 2026-03-24 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 384求調(diào)劑 +3 | 子系博 2026-03-22 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑院校信息 +6 | CX 330 2026-03-21 | 6/300 |
|