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freezymind新蟲 (初入文壇)
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[求助]
關(guān)于EDC/NHS 請(qǐng)教各位大牛
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最近在做Fe3O4-Au納米粒子連赫賽�。ㄒ环N單克隆抗體藥物）的實(shí)驗(yàn)，試了挺多遍都沒有理想的結(jié)果，各位大牛幫忙看看哪里出問題了： 我的具體步驟： 1、5mg連有PEG-COOH納米粒子溶于5ml水中， 2、加入固體EDC.HCL 220mg(文獻(xiàn)上看來的，50、100mg也都試過） sulfo-NHS 200mg(EDC.HCL/sulfo-NHS 1:1 5:1 10:1也都試過），調(diào)節(jié)PH至5.0左右，室溫卵育15min(30min 1h 2h都試過）， 3、硼砂緩沖液調(diào)節(jié)至7.0（亦曾試過用超濾管去除EDC NHS后調(diào)節(jié)PH）加入赫賽汀室溫2h（室溫過夜、4°2h過夜都試過）。 離心后沒什么沉淀出來啊，文獻(xiàn)上說會(huì)有沉淀出現(xiàn)的。請(qǐng)大牛們幫我看看哪里出問題了，感激不盡 |
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你可以稍微參考下這個(gè)http://wenku.baidu.com/view/ab83173510661ed9ad51f3b4.html 你可以看到從反應(yīng)機(jī)理上看PEG-COOH：EDC：NHS=1：1：1就可以啦。 但是為了要保證轉(zhuǎn)化率，稍微多加一些，但也不至于加到幾百倍吧。 在你的試驗(yàn)中：5mg連有PEG-COOH納米粒子溶于5ml水中，加入固體EDC.HCL 220mg(文獻(xiàn)上看來的。PEG-COOH：EDC：NHS（摩爾比）應(yīng)該不止1：100：100吧。 我覺得你就用我上面給你回復(fù)的步驟試一下，應(yīng)該沒有問題。  |
7樓2013-08-17 16:53:38
xingjiuwcc
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| 你看下這個(gè)貼：http://www.gaoyang168.com/bbs/viewthread.php?tid=5331024 我覺得你的步驟有問題，一般不這樣做吧。還有你的EDC.HCL/sulfo-NHS都是EDC的量高，是不是該NHS的量多投些吧。我最近也在調(diào)研文獻(xiàn)，也要做這種反應(yīng)，希望多交流下吧。 |
3樓2013-08-17 09:36:42
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