 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 查看: 3441 | 回復(fù): 13 | |||
xiaoganghehe銅蟲 (著名寫手)
|
[求助]
該怎么理解胞內(nèi)酶和胞外酶？高速離心能讓大腸桿菌細(xì)胞破裂嗎？
|
||
|
小蟲是學(xué)材料的，最近在做關(guān)于大腸桿菌的實(shí)驗(yàn)，但對(duì)生物一竅不通，因此請(qǐng)教幾個(gè)問題。 我的實(shí)驗(yàn)過程如下：在含乳糖的培養(yǎng)基中培養(yǎng)大腸桿菌，目的是誘導(dǎo)大腸桿菌產(chǎn)生β－半乳糖苷酶。隨后離心（轉(zhuǎn)速5000），用NaCl溶液清洗菌體，再離心（轉(zhuǎn)速7000），然后用PBS溶液清洗菌體沉淀，得到菌體濁液。然后再往菌體濁液中加入ONPG，ONPG是β－半乳糖苷酶的底物。論文上說，對(duì)于大腸桿菌，β－半乳糖苷酶是胞內(nèi)酶。但在離心分離之后，我往菌液中加入ONPG，溶液很快就變成黃色了。 所以很困惑：既然β－半乳糖苷酶是胞內(nèi)酶，為什么ONPG很快就水解了呢？難道是β－半乳糖苷酶能被大腸桿菌很快釋放到溶液中？或者離心能使大腸桿菌細(xì)胞破裂，β－半乳糖苷酶被釋放出來？ 希望能聽聽高人的意見，能給出意見和建議最好！ |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
各位老師好，我的一志愿為北京科技大學(xué)085601材料專碩
已經(jīng)有8人回復(fù)
-
求調(diào)劑，一志愿 南京航空航天大學(xué) ，080500材料科學(xué)與工程學(xué)碩，總分289分
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
279求調(diào)劑
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
求調(diào)劑一志愿武漢理工大學(xué)材料工程（085601）
已經(jīng)有8人回復(fù)
-
297求調(diào)劑
已經(jīng)有7人回復(fù)
-
343求調(diào)劑
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
085600，專業(yè)課化工原理，321分求調(diào)劑
已經(jīng)有5人回復(fù)
-
311求調(diào)劑
已經(jīng)有5人回復(fù)
-
南京大學(xué)化學(xué)調(diào)劑
已經(jīng)有6人回復(fù)
-
一志愿華東師范大學(xué)有機(jī)化學(xué)專業(yè)，初試351分，復(fù)試被刷求調(diào)劑!
已經(jīng)有4人回復(fù)
» 本主題相關(guān)商家推薦: (我也要在這里推廣)
» 本主題相關(guān)價(jià)值貼推薦，對(duì)您同樣有幫助:
- 野生菌產(chǎn)脂肪酶問題
已經(jīng)有13人回復(fù)
- 胞內(nèi)酶不能用超聲破碎怎么辦？
已經(jīng)有15人回復(fù)
- 絲狀真菌菌絲體破碎細(xì)胞壁，不要胞內(nèi)酶，求助最簡(jiǎn)單的實(shí)驗(yàn)方法。。。
已經(jīng)有18人回復(fù)
- 霉菌中形成的脂肪酶是胞內(nèi)酶 還是胞外酶？
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 拮抗菌(真菌如木霉)產(chǎn)生的幾丁質(zhì)酶為什么不會(huì)破壞自身的細(xì)胞壁？
已經(jīng)有13人回復(fù)
mizhoulong
木蟲 (著名寫手)
環(huán)境衛(wèi)生、微生物學(xué)
- MicEPI: 2
- 應(yīng)助: 211 (大學(xué)生)
- 金幣: 2980.3
- 散金: 30
- 紅花: 13
- 帖子: 1853
- 在線: 194.3小時(shí)
- 蟲號(hào): 612016
- 注冊(cè): 2008-09-25
- 性別: GG
- 專業(yè): 環(huán)境衛(wèi)生
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
xiaoganghehe: 金幣+4, ★★★很有幫助, 挺好的 2013-08-26 15:01:31
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
xiaoganghehe: 金幣+4, ★★★很有幫助, 挺好的 2013-08-26 15:01:31
|
這個(gè)是生化書上最經(jīng)典的知識(shí)啊，乳糖操縱子啊。 LacZ基因--合成半乳糖苷酶 LacY基因--合成通透酶 LacA基因--合成乙�；D(zhuǎn)移酶 三個(gè)酶，其中起作用的是半乳糖苷酶，通透酶可以將半乳糖苷酶轉(zhuǎn)移到胞外。 當(dāng)然，胞內(nèi)酶也可以少量釋放到胞外，這個(gè)在研制大腸桿菌培養(yǎng)基的時(shí)候仔細(xì)研究過，呵呵 |
4樓2013-08-26 08:40:53
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
xiaoganghehe: 金幣+1, ★★★很有幫助, 有幫助 2013-08-23 20:57:30
laozuzunzhe: 金幣+3, good！ 2013-08-24 08:34:28
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
xiaoganghehe: 金幣+1, ★★★很有幫助, 有幫助 2013-08-23 20:57:30
laozuzunzhe: 金幣+3, good！ 2013-08-24 08:34:28
|
即便是胞內(nèi)酶，在誘導(dǎo)過程中也會(huì)被少量的釋放， 菌體細(xì)胞的破壞死亡也會(huì)使得胞內(nèi)酶釋放。 若是冷凍高速離心的話，也會(huì)多少破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)。 再有PBS多少也有改變細(xì)胞通透性的作用。 而且可能跟你的酶活也有關(guān)。 個(gè)人意見，權(quán)當(dāng)參考吧。 |
2樓2013-08-23 20:36:06
xiaoganghehe
銅蟲 (著名寫手)
- 應(yīng)助: 9 (幼兒園)
- 金幣: 13.7
- 散金: 184
- 紅花: 17
- 帖子: 2031
- 在線: 404.5小時(shí)
- 蟲號(hào): 1238884
- 注冊(cè): 2011-03-19
- 性別: GG
- 專業(yè): 碳素材料與超硬材料
3樓2013-08-23 20:57:42
xiaoganghehe
銅蟲 (著名寫手)
- 應(yīng)助: 9 (幼兒園)
- 金幣: 13.7
- 散金: 184
- 紅花: 17
- 帖子: 2031
- 在線: 404.5小時(shí)
- 蟲號(hào): 1238884
- 注冊(cè): 2011-03-19
- 性別: GG
- 專業(yè): 碳素材料與超硬材料
5樓2013-08-26 15:04:16
bigboy2050
銅蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 38 (小學(xué)生)
- 金幣: 650.3
- 紅花: 2
- 帖子: 163
- 在線: 277.4小時(shí)
- 蟲號(hào): 1374939
- 注冊(cè): 2011-08-21
- 性別: GG
- 專業(yè): 微生物生理與生物化學(xué)
6樓2013-08-28 16:22:17
xiaoganghehe
銅蟲 (著名寫手)
- 應(yīng)助: 9 (幼兒園)
- 金幣: 13.7
- 散金: 184
- 紅花: 17
- 帖子: 2031
- 在線: 404.5小時(shí)
- 蟲號(hào): 1238884
- 注冊(cè): 2011-03-19
- 性別: GG
- 專業(yè): 碳素材料與超硬材料
7樓2013-08-28 21:06:47
bigboy2050
銅蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 38 (小學(xué)生)
- 金幣: 650.3
- 紅花: 2
- 帖子: 163
- 在線: 277.4小時(shí)
- 蟲號(hào): 1374939
- 注冊(cè): 2011-08-21
- 性別: GG
- 專業(yè): 微生物生理與生物化學(xué)
8樓2013-08-29 08:58:03
xiaoganghehe
銅蟲 (著名寫手)
- 應(yīng)助: 9 (幼兒園)
- 金幣: 13.7
- 散金: 184
- 紅花: 17
- 帖子: 2031
- 在線: 404.5小時(shí)
- 蟲號(hào): 1238884
- 注冊(cè): 2011-03-19
- 性別: GG
- 專業(yè): 碳素材料與超硬材料
9樓2013-08-29 09:12:12
bigboy2050
銅蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 38 (小學(xué)生)
- 金幣: 650.3
- 紅花: 2
- 帖子: 163
- 在線: 277.4小時(shí)
- 蟲號(hào): 1374939
- 注冊(cè): 2011-08-21
- 性別: GG
- 專業(yè): 微生物生理與生物化學(xué)
10樓2013-08-29 14:40:08
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 xiaoganghehe 的主題更新
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 本科雙非材料，跨考一志愿華電085801電氣，283求調(diào)劑，任何專業(yè)都可以 +6 | 芝士雪baoo 2026-03-28 | 8/400 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 291求調(diào)劑 +3 | Y-cap 2026-03-29 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 070300化學(xué)354求調(diào)劑 +4 | 101次希望 2026-03-28 | 4/200 |
|
|
[碩博家園] 求調(diào)劑 330分 085600材料與化工 +3 | gqhhh 2026-03-22 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 283求調(diào)劑 +3 | A child 2026-03-28 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 一志愿北京工業(yè)大學(xué)，324分求調(diào)劑 +4 | 零八# 2026-03-28 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 299求調(diào)劑 +7 | 嗯嗯嗯嗯2 2026-03-27 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 085701環(huán)境工程，267求調(diào)劑 +16 | minht 2026-03-26 | 16/800 |
|
|
|
[考研] 081200-314 +3 | LILIQQ 2026-03-27 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 331環(huán)境科學(xué)與工程求調(diào)劑 +3 | 熠然好運(yùn)氣 2026-03-27 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 265求調(diào)劑 +8 | 小木蟲085600 2026-03-27 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 085600，材料與化工321分調(diào)劑 +4 | 大饞小子 2026-03-27 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑，一志愿 南京航空航天大學(xué)大學(xué) ，080500材料科學(xué)與工程學(xué)碩 +4 | @taotao 2026-03-26 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 317求調(diào)劑 +7 | 蛋黃咸肉粽 2026-03-26 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 一志愿 本科 北科大 化學(xué) 343 +6 | 13831862839 2026-03-24 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 263求調(diào)劑 +6 | yqdszhdap－ 2026-03-22 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 機(jī)械學(xué)碩總分317求調(diào)劑�。。。� +4 | Acaciad 2026-03-25 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 網(wǎng)絡(luò)空間安全0839招調(diào)劑 +4 | w320357296 2026-03-25 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 材料專碩找調(diào)劑 +5 | 哈哈哈吼吼吼哈 2026-03-23 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 一志愿山東大學(xué)藥學(xué)學(xué)碩求調(diào)劑 +3 | 開開心心沒煩惱 2026-03-23 | 4/200 |
|