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mengxiaoruan新蟲 (初入文壇)
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[求助]
HPLC，同樣的方法，不出峰了，之后基線各種漂是什么問題？然后又各種問題
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測(cè)的是花青苷，流動(dòng)相是A：10%甲酸 B：甲醇，梯度洗脫。用的是waters的二極管陣列檢測(cè)器。 前幾天測(cè)試的時(shí)候換了根柱子，其余的方法什么的都沒變。之前用的是dikma的，這根是waters的。以前有師兄測(cè)多酚的時(shí)候兩根混用過，效果也不差很多。 但是，昨天測(cè)的花青苷，基線是好的，就是不出峰了，只有溶劑峰。 然后我就把柱子換成原來(lái)那根了，開始的時(shí)候基線不太平，然后又用超純水，甲醇換比例沖了一會(huì)兒。然后，每次大概到10分鐘左右的時(shí)候，基線就突然垂直階梯式上揚(yáng)了，然后上去之后還一直是平的，再也不下來(lái)。 平衡了好久都是這樣。然后下午的時(shí)候還突然停了幾秒電…… 之后又拿10%甲醇、90%甲醇，純甲醇各沖了兩個(gè)小時(shí)吧。今天早上的時(shí)候，基線又平了。 拿標(biāo)樣試了，還是只有溶劑峰。然后提高標(biāo)樣濃度，還是只有溶劑峰。然后拿純甲醇進(jìn)樣，還是只有溶劑峰（溶劑是甲醇）。但是到10分鐘左右的時(shí)候，基線又開始飄了……原來(lái)樣品的保留時(shí)間是8.4分鐘左右。 之后又平衡基線一個(gè)小時(shí)，還是各種起伏的…… 柱壓一直較為穩(wěn)定，2100-2200左右。尤其是昨天十分鐘突然上揚(yáng)的時(shí)候，我是盯著的，柱壓那一段一直無(wú)變化。然后檢測(cè)器以及柱子周圍也沒發(fā)現(xiàn)漏液現(xiàn)象。 溫度是柱溫箱控制的。 這個(gè)方法柱子標(biāo)樣等等都是上周才用過的，流動(dòng)相是前天晚上配的，超聲了。 求大神分析…… |
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