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jiyu新蟲 (初入文壇)
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[求助]
平板保存的菌再劃線長不出來了
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大家好。我使用5月份4℃保存的黃桿菌平板（用來做PAH的生物降解），沒長出來。就用液體培養(yǎng)基試了下。具體操作步驟是： 1、將裝有液體培養(yǎng)基（封口）的三角瓶直接放在無菌操作臺上，開紫外滅菌30分鐘。（以前師姐都是放入滅菌鍋，我嫌耗時長，就偷了個懶，按理說紫外也可以殺菌哈。） 2、然后將5月份的平板菌，挑了一環(huán)到液體里。放在水浴振蕩器里培養(yǎng)。 第3天培養(yǎng)液透明度降低，呈現(xiàn)黃色。我想著應(yīng)該是長出來了。但是擔心活性不夠。就重復(fù)上述步驟。將培養(yǎng)液里的菌液重新接入新的培養(yǎng)液里繼續(xù)振蕩培養(yǎng)。但是今天是第3天，我發(fā)現(xiàn)新的三個轉(zhuǎn)接瓶里，一個變成深綠色了（懷疑染菌�。�，其他兩個的液面均出現(xiàn)白色的泡沫。求助： 1、這是否是染菌現(xiàn)象？ 2、因為黃桿菌出現(xiàn)過平板傳代不長菌，這說明菌已失活，我再用它在液體里長出來了。需要重復(fù)的用液體轉(zhuǎn)接嗎？還是說只要長出來了，就可以再接入平板？ 3、我的操作步驟是否有問題？ 因微生物知識欠缺，還請大家指點，感激不盡！ |
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jiyu
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9樓2013-08-31 15:09:54
jiyu
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2樓2013-08-30 21:10:22
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【答案】應(yīng)助回帖
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laozuzunzhe: 金幣+3, 鼓勵熱心應(yīng)助！ 2013-08-30 23:43:55
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1、絕對染菌了�。�！ 培養(yǎng)基一定要采取高壓滅菌，你隔著瓶子照照紫外是沒用的。超凈臺里面的紫外燈只是能對直接照射到的臺面和你瓶子的外表面起作用。而且整個操作過程中的槍頭等也要高壓滅菌！ 2、一般菌種都是用20%的甘油保存在-80℃冰箱內(nèi)，你在4度放了5個月不一定再用液體能搖起來。如果搖起來了，你就涂個板，看看平板上長起來的菌是不是你要的黃桿菌。 好在樓主最后說了自己微生物學(xué)知識欠缺，不然我不能相信學(xué)微生物的敢這樣操作。。。。請注意無菌操作，還有聽聽你師姐的建議。 |
3樓2013-08-30 22:06:49
jiyu
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4樓2013-08-31 10:23:17
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