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lanhuaorchid金蟲 (著名寫手)
orchid
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[求助]
50L發(fā)酵罐,有關轉(zhuǎn)速、溶氧什么的問題,大家?guī)兔ρ,謝謝 已有2人參與
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重組大腸桿菌培養(yǎng),高密度發(fā)酵,感覺溶氧很重要,不知怎么控制 1) 一般在OD多少的時候誘導,最終會獲得很高的菌濃? 2) 一般設置轉(zhuǎn)速與DO偶聯(lián)么?還是補糖與DO偶聯(lián)? 3) 尾氣之前的濾芯很容易濕,導致滅菌降溫過程中壓力升高,發(fā)酵過程中也會有罐壓升高至1.5bar不能放掉,可能是因為發(fā)酵過程中的少量泡沫導致濾芯濕掉的, 4) 濕掉的濾芯風干就可以再用了么,或者有什么更好的清洗方法? 5) 50L發(fā)酵罐裝液40L,一般大家補糖都要補多少? 謝謝 |
高密度發(fā)酵 |

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重組大腸桿菌因為不同的基因改造。導致生長速率有明顯差異。一般最高具體濃度在16-24個小時左右。也有部分在發(fā)酵過程中,一直在緩慢增長。這與補料體積、濃度都有關系。 溶氧與轉(zhuǎn)速偶聯(lián),或者補糖偶聯(lián),需要自己摸索參數(shù),看哪是的波動對發(fā)酵影響最大。 一般濾芯長時間被水浸潤后,會導致過濾效果下降,產(chǎn)生染菌。被發(fā)酵液污染后,建議更換濾芯。如非要清洗,可用無水乙醇浸泡,沖洗。因為聚四氟乙烯材料,是耐乙醇的。實踐中,檢測濾芯的好壞,也是用乙醇加壓檢測的。 50L發(fā)酵罐,很難裝液到40L。在發(fā)酵過程中,泡沫太大了。計算發(fā)酵液體積,是按照底料量、補糖濃度和體積、轉(zhuǎn)化效率、等等計算出來的。一般50L發(fā)酵罐底料體積20-25L,根據(jù)不了情況不同,進行控制。 |
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