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lanhuaorchid金蟲 (著名寫手)
orchid
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[求助]
50L發(fā)酵罐，有關轉(zhuǎn)速、溶氧什么的問題，大家?guī)兔ρ�，謝謝 已有2人參與
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重組大腸桿菌培養(yǎng)，高密度發(fā)酵，感覺溶氧很重要，不知怎么控制 1） 一般在OD多少的時候誘導，最終會獲得很高的菌濃？ 2） 一般設置轉(zhuǎn)速與DO偶聯(lián)么？還是補糖與DO偶聯(lián)？ 3） 尾氣之前的濾芯很容易濕，導致滅菌降溫過程中壓力升高，發(fā)酵過程中也會有罐壓升高至1.5bar不能放掉，可能是因為發(fā)酵過程中的少量泡沫導致濾芯濕掉的， 4） 濕掉的濾芯風干就可以再用了么，或者有什么更好的清洗方法？ 5） 50L發(fā)酵罐裝液40L，一般大家補糖都要補多少？ 謝謝 |
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 高密度發(fā)酵 |
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3樓2013-11-01 17:08:19
【答案】應助回帖
★ ★ ★ ★ ★
lanhuaorchid: 金幣+5, ★★★很有幫助 2013-10-12 13:46:14
lanhuaorchid: 金幣+5, ★★★很有幫助 2013-10-12 13:46:14
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重組大腸桿菌因為不同的基因改造。導致生長速率有明顯差異。一般最高具體濃度在16-24個小時左右。也有部分在發(fā)酵過程中，一直在緩慢增長。這與補料體積、濃度都有關系。 溶氧與轉(zhuǎn)速偶聯(lián)，或者補糖偶聯(lián)，需要自己摸索參數(shù)，看哪是的波動對發(fā)酵影響最大。 一般濾芯長時間被水浸潤后，會導致過濾效果下降，產(chǎn)生染菌。被發(fā)酵液污染后，建議更換濾芯。如非要清洗，可用無水乙醇浸泡，沖洗。因為聚四氟乙烯材料，是耐乙醇的。實踐中，檢測濾芯的好壞，也是用乙醇加壓檢測的。 50L發(fā)酵罐，很難裝液到40L。在發(fā)酵過程中，泡沫太大了。計算發(fā)酵液體積，是按照底料量、補糖濃度和體積、轉(zhuǎn)化效率、等等計算出來的。一般50L發(fā)酵罐底料體積20-25L，根據(jù)不了情況不同，進行控制。 |
2樓2013-10-09 13:43:42
wzq_ing
金蟲 (正式寫手)
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4樓2013-11-02 08:37:16
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