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HeLa細胞傳代后90% 死亡,求解
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本人菜鳥,才開始學養(yǎng)細胞。 替別人傳 細胞,結果HeLa細胞狀態(tài)好,長的太快,本是第二天下午傳的,結果沒時間,第三天中午傳的。因為細胞長的很滿,不過也有很多死細胞,就一個大瓶傳了一個中瓶,兩個大瓶。鏡檢,三個瓶子中細胞濃度很大。根據(jù)以前的經驗,長一天絕對很滿。結果第四天早上,也就是今天早晨看的時候,90%的細胞飄起來了,只有10%細胞貼壁生長,而且狀態(tài)不好。 這次的培養(yǎng)基是新配的,初步認為可能是新配置的培養(yǎng)基沒有混合均勻,因為我加入FBS和雙抗之后,只是左右晃動幾下培養(yǎng)基,10min之后開始用這個培養(yǎng)基(配置培養(yǎng)基后才開始消化細胞),不知道是不是這個原因。 雙抗是找別人借的,人家說濃度是100 X 的。DMEM是新的,F(xiàn)BS是用過的,冰箱放置了約3天吧。 其次是前天傳了一批自己養(yǎng)的HeLa細胞,培養(yǎng)基是以前的,昨天看還是可以的,死細胞不多,只是貼壁細胞不多,但是今天早上看的時候,也是很多死細胞,狀態(tài)不好,不知道什么原因。 不知道是不是污染導致這些細胞離我而去?求大俠們解答。 |
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