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[求助]
關(guān)于一個(gè)MTT毒性試驗(yàn)的問題
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各位生物界大神，本人生物小白最近要做一個(gè)細(xì)胞毒性試驗(yàn)，是檢測(cè)納米顆粒的毒性的，我需要做一個(gè)時(shí)間對(duì)照試驗(yàn)，24h、48h、72h、96h和120h。我看了MTT試驗(yàn)的操作過程，一般是細(xì)胞培養(yǎng)好之后再加入到96孔板里面再加顆粒培養(yǎng)，然后加MTT檢測(cè)。我想問的是，比如我做120小時(shí)的那個(gè)組，我在這個(gè)檢測(cè)過程中細(xì)胞會(huì)長滿需要傳代，這我是按照正常的方式胰酶處理然后繼續(xù)加培養(yǎng)基培育嗎？這不會(huì)對(duì)最終的結(jié)果帶來影響嗎，而且我一開始加入顆粒，在我換培養(yǎng)液之后還需要重新加顆粒嗎，如果要加這不也是會(huì)產(chǎn)生影響嗎？如果不用傳代的話細(xì)胞由于空間變小導(dǎo)致死亡這結(jié)果也是不準(zhǔn)確的啊! 懇請(qǐng)個(gè)位大蝦幫助小白啊，小白不甚感激�。。� |
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helen112233
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72小時(shí)在論文里面見過，96小時(shí)貌似很少見（個(gè)人沒什么印象），120小時(shí)太夸張了吧？！ 建議樓主應(yīng)該多看點(diǎn)論文， 看看比人論文怎么做的，目前個(gè)人還沒有看到120小時(shí)的，不用點(diǎn)板，直接在培養(yǎng)瓶里，細(xì)胞留少少的，120小時(shí)不換液試試。 MTT 如果留的細(xì)胞太少的話，養(yǎng)的時(shí)間長了，不同孔之間細(xì)胞個(gè)數(shù)的差異被放大，實(shí)驗(yàn)很難有說服性的。 |
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河水流云7樓2013-10-14 21:23:55
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2樓2013-10-12 21:31:32
3樓2013-10-13 08:57:38
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4樓2013-10-13 10:40:26
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5樓2013-10-13 10:42:19
6樓2013-10-13 16:05:53
8樓2013-10-16 08:58:25
| 你是檢測(cè)這些微粒的細(xì)胞毒性，我具體不知道你用的是什么細(xì)胞，我們這里用的是L929細(xì)胞，如果要做的話首先將你的微粒加入到培養(yǎng)基內(nèi)，同時(shí)做空白對(duì)照、陽性對(duì)照、陰性對(duì)照好以及平行樣，注意你的檢測(cè)樣品是放到培養(yǎng)基里面后成為陽性的，細(xì)胞鋪板后培養(yǎng)24小時(shí)，然后將鋪板時(shí)的培養(yǎng)液吸出，分別加入空白對(duì)照、陽性對(duì)照、陰性對(duì)照和樣品的浸提液，培養(yǎng)2天后，就可以用MTT法檢測(cè)OD值了。希望能夠?qū)δ阌袔椭?img src="https://muchongimg.xmcimg.com/data/emuch_bbs_images/smilies/cool.gif" align="absmiddle" border="0"> |
9樓2013-10-24 16:08:54
10樓2013-10-25 10:25:57
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