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[求助]
關(guān)于一個(gè)MTT毒性試驗(yàn)的問題
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各位生物界大神，本人生物小白最近要做一個(gè)細(xì)胞毒性試驗(yàn)，是檢測(cè)納米顆粒的毒性的，我需要做一個(gè)時(shí)間對(duì)照試驗(yàn)，24h、48h、72h、96h和120h。我看了MTT試驗(yàn)的操作過程，一般是細(xì)胞培養(yǎng)好之后再加入到96孔板里面再加顆粒培養(yǎng)，然后加MTT檢測(cè)。我想問的是，比如我做120小時(shí)的那個(gè)組，我在這個(gè)檢測(cè)過程中細(xì)胞會(huì)長(zhǎng)滿需要傳代，這我是按照正常的方式胰酶處理然后繼續(xù)加培養(yǎng)基培育嗎？這不會(huì)對(duì)最終的結(jié)果帶來影響嗎，而且我一開始加入顆粒，在我換培養(yǎng)液之后還需要重新加顆粒嗎，如果要加這不也是會(huì)產(chǎn)生影響嗎？如果不用傳代的話細(xì)胞由于空間變小導(dǎo)致死亡這結(jié)果也是不準(zhǔn)確的啊! 懇請(qǐng)個(gè)位大蝦幫助小白啊，小白不甚感激�。�！ |
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helen112233
木蟲 (正式寫手)
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72小時(shí)在論文里面見過，96小時(shí)貌似很少見（個(gè)人沒什么印象），120小時(shí)太夸張了吧？！ 建議樓主應(yīng)該多看點(diǎn)論文， 看看比人論文怎么做的，目前個(gè)人還沒有看到120小時(shí)的，不用點(diǎn)板，直接在培養(yǎng)瓶里，細(xì)胞留少少的，120小時(shí)不換液試試。 MTT 如果留的細(xì)胞太少的話，養(yǎng)的時(shí)間長(zhǎng)了，不同孔之間細(xì)胞個(gè)數(shù)的差異被放大，實(shí)驗(yàn)很難有說服性的。 |
河水流云7樓2013-10-14 21:23:55
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4樓2013-10-13 10:40:26
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