風(fēng)雨山林

7樓: Originally posted by jonathan1983 at 2013-10-17 10:15:33
你說的模板濃度不高，我不知道在什么范圍內(nèi)。一般我提取基因組DNA后先把模板取出部分，稀釋50倍左右再當(dāng)模板。其次，PCR出不來跟Tm關(guān)系很大，不清楚你的溫度選的多少，一般要低于Tm值5度左右...

這是已經(jīng)摸好的條件，基因已經(jīng)P出來了，我是想把這個基因轉(zhuǎn)到其他的菌里去，我電轉(zhuǎn)化后把菌提質(zhì)粒，沒看到轉(zhuǎn)進去的基因，看到了上面的條帶，所以想問一下上面的條帶是什么

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8樓2013-10-21 20:01:46

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jonathan1983

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8樓: Originally posted by 風(fēng)雨山林 at 2013-10-21 20:01:46
這是已經(jīng)摸好的條件，基因已經(jīng)P出來了，我是想把這個基因轉(zhuǎn)到其他的菌里去，我電轉(zhuǎn)化后把菌提質(zhì)粒，沒看到轉(zhuǎn)進去的基因，看到了上面的條帶，所以想問一下上面的條帶是什么...

上面的條帶我也不清楚。遇到這種情況我會重新提一次再看看什么結(jié)果

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9樓2013-10-23 11:37:27

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其實根據(jù)經(jīng)驗，你這應(yīng)該都是二聚體！
真要是裝上去了，質(zhì)粒PCR會很亮的！

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10樓2013-10-23 17:29:23

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