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偶像的黃昏yy銅蟲 (小有名氣)
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[求助]
求教關(guān)于DTNB！��！ 已有3人參與
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| 測二硫鍵時，DTNB難溶于水，加熱后依然難溶，請問有哪位高手做過這個實驗，幫忙教一下 |
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1012203014
金蟲 (正式寫手)
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- 性別: GG
- 專業(yè): 化學(xué)反應(yīng)工程
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測定總巰基含量時，15 mg蛋白樣品溶解于5 mL含8 M 尿素的Tris-Gly 緩沖液（0.086 M Tris, 0.09 M Gly 和 0.04 M EDTA, pH 8.0）。測定自由巰基含量時，15 mg樣品溶解于5 mL不含尿素的上述Tris-Gly 緩沖液中，而后加入50 μL Ellman 試劑 （DTNB, 即5,5-二硫基雙2-硝基苯甲酸溶于Tris-Gly 緩沖液，4 mg/mL），在25℃條件下保溫反應(yīng)60 min, 離心（5000 g, 15 min），上清液在412 nm 處測定吸光值，以含Ellman 試劑的Tris-Gly 緩沖液為空白對照。 巰基含量的計算公式如下： SH (μmol/g) = 73.53×A ×D/C 式中：A —除去試劑空白后樣品的吸光度值 D—稀釋倍數(shù) C—樣品濃度（mg/mL） 問題1：上述公式中稀釋倍數(shù)D是怎么算的（具體的式子），如果完全按照上述方法是不是就是1？ 問題2：我測的物質(zhì)為毛發(fā)固體樣品，二硫鍵含量在350μmol/g附近，此種測試方法是否具有可行性 謝謝了  |
9樓2015-09-25 20:42:47
user59888
金蟲 (文壇精英)
宮創(chuàng)始人 ------小妮
- 食品EPI: 15
- 應(yīng)助: 461 (碩士)
- 貴賓: 0.463
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- 注冊: 2012-04-05
- 專業(yè): 食品加工技術(shù)
【答案】應(yīng)助回帖
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
|
http://www.gaoyang168.com/bbs/viewthread.php?tid=5080927&fpage=1 我不是很懂，但是里面很多人都做過，應(yīng)該懂，建議聯(lián)系他們，耐心請教 |
2樓2013-10-14 11:24:29
煜，莫煩惱
木蟲 (著名寫手)
蟲蛹
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3樓2013-10-14 14:37:26
禍不單行1246
銀蟲 (初入文壇)
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4樓2013-10-14 15:34:17
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