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guxiaolong金蟲(chóng) (小有名氣)
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[交流]
求教關(guān)于液相色譜柱的問(wèn)題
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本人不會(huì)做液相色譜分析。但是試驗(yàn)需要用它來(lái)檢測(cè)5種脫氧核苷的含量。查文獻(xiàn)有以下較為簡(jiǎn)便的方法: 色譜柱:symmetryshield TM RP18柱(150x3.9mm,靴m);流動(dòng)相:0.1%(V:V)磷酸(H3P04),并用三乙胺調(diào)PH值為3.O;流速:1.OmL/min;檢測(cè)器波長(zhǎng):273nm;柱溫:25"(2;靈敏度:2.0000AUFS;進(jìn)樣量20ul。 但是我這邊只有C18的柱子。我想用上面的條件來(lái)做。 不知道C18柱子和symmetryshield TM RP18柱子有何區(qū)別,不知是否可以用上面的流動(dòng)相。 [ Last edited by guxiaolong on 2011-12-12 at 23:01 ] |
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我之前也用過(guò)液相,有些了解,這里就談?wù)勎业目捶。供你參考?br />
C18(C-18)、ODS、RP18(RP-18)雖然都是十八烷基鍵合固定相,但還是有一定區(qū)別的。目前用的主要有三種。 1)普通的C18或相應(yīng)的C8色譜柱,如Waters的Symmetry C18或C8,YMC的Pack Pro C18或C8,Agilent的RX C8等,其它公司如菲羅門和熱電也有相應(yīng)的色譜柱; 2)封端處理的或者極性嵌入型色譜柱,如Waters的Symmetry Shield RP18或RP8,XTerra RP18或RP8,YMC的ODS AQ,Agilent的Zorbax SB AQ等,其它公司如菲羅門和熱電也有相應(yīng)的色譜柱; 3)填料用其它官能團(tuán)修飾過(guò)的色譜柱,如苯基柱等,很多公司都有。 一般認(rèn)為C18是連接了18烷基碳鏈的反相固定相的總稱,除了硅膠基質(zhì)外,還可以包括其他基質(zhì)的填料,比如高聚物小球?yàn)榛|(zhì)及其它新型基質(zhì)鍵合C18鏈形成的反相固定相。而ODS是以硅膠或陶瓷為基質(zhì)鍵合的C18填料。因?yàn)榇蟛糠諧18柱是硅膠基質(zhì),因此,在很多場(chǎng)合二者是一樣的。 ODS其后所標(biāo)的1、2、3、4、5有的是指含碳量的不同,有的是不同代的替換產(chǎn)品,如Spherisorb的ODS-1是指未經(jīng)封尾處理的,含碳量為5.75%,ODS-2是經(jīng)封尾處理的,含碳量為11.5%。不同廠家的ODS柱性能差異很明顯。 RP在不同廠家中使用的含義也不太一致,在Waters的色譜柱中,RP18(8)是指經(jīng)過(guò)改進(jìn)的新型C18(8)柱,其不同在于在經(jīng)典直鏈配體之間內(nèi)嵌極性基團(tuán),其選擇性同C18(8)有很大的差異,特別是對(duì)含酚基官能團(tuán)的化合物。Agilent的Bonus-RP柱中RP的含義同Waters。但是在Merck公司的色譜柱中,RP-18同C18意義相同,包括硅膠基質(zhì)、氧化鋁基質(zhì)、聚合物基質(zhì)及一體化的Chromolith柱。 因此,光從C18(C-18)、RP18(RP-18)、ODS字面上很難區(qū)別不同廠家色譜柱之間的差異,最好從有關(guān)廠家的資料中尋找。 建議:你可以用上面的流動(dòng)相試一試,應(yīng)該是沒(méi)有問(wèn)題的。 |
銅蟲(chóng) (初入文壇)
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有區(qū)別的。 SymmetryShield RP18是waters公司的分析柱,有自己的一些特點(diǎn)。 1)高親水或全水性 2)在寬的pH范圍(2-8)顯著改善堿性物質(zhì)的峰型 3)有自己獨(dú)特的選擇性,相對(duì)于普通C18 4)高度重現(xiàn)性 總結(jié)來(lái)說(shuō),就是一根非常好的柱子,比一般的C18柱子好。 至于你的問(wèn)題,先要看下你的色譜條件是否苛刻,符合一般柱子使用不,如果符合一般柱子使用條件,可以使用普通C18,使用后能否峰型好且分離度好那就是另一回事了,需要試驗(yàn)了。 |
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