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[交流]
求教關于液相色譜柱的問題
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本人不會做液相色譜分析。但是試驗需要用它來檢測5種脫氧核苷的含量。查文獻有以下較為簡便的方法： 色譜柱：symmetryshield TM RP18柱(150x3．9mm，靴m)；流動相：0．1％(V：V)磷酸(H3P04)，并用三乙胺調PH值為3．O；流速：1．OmL／min；檢測器波長：273nm；柱溫：25"(2；靈敏度：2．0000AUFS；進樣量20ul。 但是我這邊只有C18的柱子。我想用上面的條件來做。 不知道C18柱子和symmetryshield TM RP18柱子有何區(qū)別，不知是否可以用上面的流動相。 [ Last edited by guxiaolong on 2011-12-12 at 23:01 ] |
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小木蟲(金幣+0.5):給個紅包，謝謝回帖
guxiaolong(金幣+2): 2011-12-12 23:03:35
lk590(金幣+1): 謝謝參與 2011-12-13 07:59:02
小木蟲(金幣+0.5):給個紅包，謝謝回帖
guxiaolong(金幣+2): 2011-12-12 23:03:35
lk590(金幣+1): 謝謝參與 2011-12-13 07:59:02
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我之前也用過液相，有些了解，這里就談談我的看法。供你參考。 C18(C-18)、ODS、RP18(RP-18)雖然都是十八烷基鍵合固定相，但還是有一定區(qū)別的。目前用的主要有三種。 1)普通的C18或相應的C8色譜柱，如Waters的Symmetry C18或C8，YMC的Pack Pro C18或C8，Agilent的RX C8等，其它公司如菲羅門和熱電也有相應的色譜柱; 2)封端處理的或者極性嵌入型色譜柱，如Waters的Symmetry Shield RP18或RP8，XTerra RP18或RP8，YMC的ODS AQ，Agilent的Zorbax SB AQ等，其它公司如菲羅門和熱電也有相應的色譜柱; 3)填料用其它官能團修飾過的色譜柱，如苯基柱等，很多公司都有。 一般認為C18是連接了18烷基碳鏈的反相固定相的總稱，除了硅膠基質外，還可以包括其他基質的填料，比如高聚物小球為基質及其它新型基質鍵合C18鏈形成的反相固定相。而ODS是以硅膠或陶瓷為基質鍵合的C18填料。因為大部分C18柱是硅膠基質，因此，在很多場合二者是一樣的。 ODS其后所標的1、2、3、4、5有的是指含碳量的不同，有的是不同代的替換產品，如Spherisorb的ODS-1是指未經封尾處理的,含碳量為5.75%，ODS-2是經封尾處理的，含碳量為11.5%。不同廠家的ODS柱性能差異很明顯。 RP在不同廠家中使用的含義也不太一致，在Waters的色譜柱中，RP18（8）是指經過改進的新型C18（8）柱，其不同在于在經典直鏈配體之間內嵌極性基團，其選擇性同C18（8）有很大的差異，特別是對含酚基官能團的化合物。Agilent的Bonus－RP柱中RP的含義同Waters。但是在Merck公司的色譜柱中，RP-18同C18意義相同，包括硅膠基質、氧化鋁基質、聚合物基質及一體化的Chromolith柱。 因此，光從C18（C-18）、RP18(RP-18)、ODS字面上很難區(qū)別不同廠家色譜柱之間的差異，最好從有關廠家的資料中尋找。 建議：你可以用上面的流動相試一試，應該是沒有問題的。 |
4樓2011-12-12 20:51:46
★ ★
小木蟲(金幣+0.5):給個紅包，謝謝回帖
guxiaolong(金幣+2): 2011-12-12 23:02:46
lk590(金幣+1): 謝謝參與 2011-12-13 07:59:09
小木蟲(金幣+0.5):給個紅包，謝謝回帖
guxiaolong(金幣+2): 2011-12-12 23:02:46
lk590(金幣+1): 謝謝參與 2011-12-13 07:59:09
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有區(qū)別的。 SymmetryShield RP18是waters公司的分析柱，有自己的一些特點。 1）高親水或全水性 2）在寬的pH范圍（2-8）顯著改善堿性物質的峰型 3）有自己獨特的選擇性，相對于普通C18 4）高度重現(xiàn)性 總結來說，就是一根非常好的柱子，比一般的C18柱子好。 至于你的問題，先要看下你的色譜條件是否苛刻，符合一般柱子使用不，如果符合一般柱子使用條件，可以使用普通C18，使用后能否峰型好且分離度好那就是另一回事了，需要試驗了。 |
3樓2011-12-12 20:35:38
ltxin2009
鐵桿木蟲 (職業(yè)作家)
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