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litterone123新蟲 (初入文壇)
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[求助]
有人不用試劑盒做出5’RACE嗎？ 已有3人參與
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| 我最近在做5’RACE，前段時間看見有人介紹不用試劑盒也能做出5'RACE.就按他的說法來做。他的帖子上寫的“在反轉(zhuǎn)錄的過程中加入5'-AAGCAGTGGTATCAACGCAGAGTACGCGGG–3'這個接頭引物。在反轉(zhuǎn)錄之后這段序列就會位于整個mRNA反轉(zhuǎn)錄出來的cDNA的最前端�！蔽矣眠@個引物做了反轉(zhuǎn)錄，然后用保守序列的引物對cDNA進(jìn)行了擴(kuò)增，確實得到了大小相符的目的片段，還心中竊喜覺得馬上大功告成了。但后來又用特異引物來擴(kuò)增5’端的時候出來的帶卻在100-250之間（我的目的帶有1500左右）。降低了退火溫度也不行。請問一下有沒有人做過類似的實驗？？？急求 。。。 |
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 RACE |
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9樓2019-08-23 16:50:40
yujitianqing
鐵蟲 (正式寫手)
- 應(yīng)助: 19 (小學(xué)生)
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2樓2013-10-21 11:33:04
3樓2014-09-22 12:07:54
Huobol
至尊木蟲 (著名寫手)
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4樓2015-09-15 09:15:36
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