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kehan777木蟲 (小有名氣)
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[求助]
轉(zhuǎn)化后涂布，陰性對照培養(yǎng)皿上長有一兩個菌落，能否繼續(xù)在陽性平皿上挑單克隆？
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轉(zhuǎn)化后涂布（已加抗生素），陰性對照培養(yǎng)皿上長有一兩個菌落，能否在陽性對照的平板上挑取單克隆，進(jìn)行后續(xù)的實驗（搖菌、保種、提質(zhì)粒、酶切鑒定。。。） 問題：陰性對照是不應(yīng)該長菌的，就算是一兩個，但是它確實長了，性質(zhì)上說是染菌了，那么陽性對照的實驗?zāi)芊窭^續(xù)？為什么？ 如果可以的話，陰性對照上有一個兩染菌影響不大，那再多幾個呢？是按比例來算陽性平皿染菌的概率嗎？ 陰性平皿上染有幾個菌的可能原因有什么？ （ 空氣中的菌能存活？感受態(tài)細(xì)胞本身有污染？抗生素死活？.....(涂布棒是沒有問題的）有什么辦法可以避免？ |
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cicelyzh
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kehan777: 金幣+10, ★有幫助, 基本上是這樣子，但沒有對我的問題進(jìn)行針對性回答 2013-10-22 19:12:25
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| 陰性平板上長幾個克隆一般的原因是抗性板是篩選壓力稍有不足。出現(xiàn)這種情況的原因可能是抗生素母液部分失效或者到平板時加抗生素時培養(yǎng)基的溫度過高。你可以用新鮮的抗生素母液重新配置抗性板，如果還出現(xiàn)這種情況，還有可能是感受態(tài)細(xì)胞的問題。如果陽性實驗平板上長的克隆比較多，可以繼續(xù)挑單克隆搖菌做進(jìn)一步驗證。如果樣品實驗板上長的克隆也很少，可能是實驗本身出了問題。 |
2樓2013-10-21 00:26:38
gaojuan1985
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kehan777
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5樓2013-10-22 19:10:24
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