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kehan777木蟲 (小有名氣)
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轉(zhuǎn)化后涂布，陰性對照培養(yǎng)皿上長有一兩個(gè)菌落，能否繼續(xù)在陽性平皿上挑單克隆？
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轉(zhuǎn)化后涂布（已加抗生素），陰性對照培養(yǎng)皿上長有一兩個(gè)菌落，能否在陽性對照的平板上挑取單克隆，進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)（搖菌、保種、提質(zhì)粒、酶切鑒定。。。） 問題：陰性對照是不應(yīng)該長菌的，就算是一兩個(gè)，但是它確實(shí)長了，性質(zhì)上說是染菌了，那么陽性對照的實(shí)驗(yàn)?zāi)芊窭^續(xù)？為什么？ 如果可以的話，陰性對照上有一個(gè)兩染菌影響不大，那再多幾個(gè)呢？是按比例來算陽性平皿染菌的概率嗎？ 陰性平皿上染有幾個(gè)菌的可能原因有什么？ （ 空氣中的菌能存活？感受態(tài)細(xì)胞本身有污染？抗生素死活？.....(涂布棒是沒有問題的）有什么辦法可以避免？ |
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kehan777
木蟲 (小有名氣)
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5樓2013-10-22 19:10:24
cicelyzh
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【答案】應(yīng)助回帖
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kehan777: 金幣+10, ★有幫助, 基本上是這樣子，但沒有對我的問題進(jìn)行針對性回答 2013-10-22 19:12:25
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kehan777: 金幣+10, ★有幫助, 基本上是這樣子，但沒有對我的問題進(jìn)行針對性回答 2013-10-22 19:12:25
| 陰性平板上長幾個(gè)克隆一般的原因是抗性板是篩選壓力稍有不足。出現(xiàn)這種情況的原因可能是抗生素母液部分失效或者到平板時(shí)加抗生素時(shí)培養(yǎng)基的溫度過高。你可以用新鮮的抗生素母液重新配置抗性板，如果還出現(xiàn)這種情況，還有可能是感受態(tài)細(xì)胞的問題。如果陽性實(shí)驗(yàn)平板上長的克隆比較多，可以繼續(xù)挑單克隆搖菌做進(jìn)一步驗(yàn)證。如果樣品實(shí)驗(yàn)板上長的克隆也很少，可能是實(shí)驗(yàn)本身出了問題。 |
2樓2013-10-21 00:26:38
gaojuan1985
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3樓2013-10-21 15:54:30
4樓2013-10-21 15:59:13
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